為研究抗菌肽JH-3對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methicilin-resistant Staphyloccocus aureus,MRSA)ATCC25923的殺菌和抗炎作用,本研究通過瓊脂擴散和最小抑菌濃度(MIC)檢測了抗菌肽JH-3對ATCC25923的抑菌作用,結(jié)果顯示JH-3對ATCC25923具有良好的殺菌作用,1 MIC的JH-3在20 min內(nèi)可使ATCC25923活菌數(shù)降低1 000倍;利用結(jié)晶紫染色和電鏡觀察檢測JH-3對ATCC25923生物膜形成的影響,結(jié)果顯示較低濃度的JH-3(0.5 MIC)可以顯著降低ATCC25923生物被膜的形成;通過細(xì)胞毒性試驗和RT-PCR在細(xì)胞水平上評價了JH-3對ATCC25923介導(dǎo)的LDH和細(xì)胞因子釋放的影響,結(jié)果顯示JH-3(50μg/mL)可以顯著降低ATCC25923介導(dǎo)的A549細(xì)胞LDH的釋放,同時JH-3還具有劑量依賴性的降低ATCC25923誘導(dǎo)的A549細(xì)胞炎癥相關(guān)細(xì)胞因子(IL-1β、IL-2和IL-6)的表達(dá);對其他8株不同的MRSA進行抑菌性測定,結(jié)果顯示JH-3對這些菌株均有很好的殺菌作用,20...

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【部分圖文】：

圖1 JH-3對MRSA ATCC25923的體外殺菌結(jié)果

細(xì)菌總蛋白的釋放檢測結(jié)果顯示，1MIC和4MIC的JH-3作用ATCC259235h和2h后，細(xì)菌培養(yǎng)液上清中總蛋白量顯著增加（OD595nm1.75±0.02、1.37±0.01vs0.65±0.03，圖1C,p<0.05），表明JH-3能夠顯著破壞細(xì)菌細(xì)胞壁和細(xì)....

圖2 抗菌肽JH-3對ATCC25923生物被膜的影響

通過不同濃度JH-3的添加，靜態(tài)培養(yǎng)MRSAATCC2592324h后結(jié)晶紫染色，觀察可見0.5MIC、0.25MIC的JH-3均對MRSAATCC25923的生物被膜形成能力有抑制作用，1MIC的JH-3即可完全消除MRSAATCC25923的生物被膜（圖2A）。....

圖3 JH-3作用后，ATCC25923誘導(dǎo)A549細(xì)胞LDH和細(xì)胞因子釋放的檢測結(jié)果

在A549細(xì)胞上評價JH-3對LDH的釋放，結(jié)果顯示，不同濃度JH-3對LDH的釋放均較小，LDH釋放率為15%，組間包括與陰性對照相比差異不顯著（圖3A,p>0.05），表明JH-3對A549細(xì)胞毒性較小，不影響正常細(xì)胞LDH的釋放；然而當(dāng)A549細(xì)胞加入ATCC25923時，....

圖4 JH-3對多種MRSA的殺菌作用測定結(jié)果

對不同MRSA菌株進行JH-3殺菌廣譜性評價，結(jié)果顯示JH-3對W3275、R89、R5886、YB57、B6994、R196、R238、R6040菌株20min內(nèi)均可使活菌數(shù)極顯著降低至103cfu/mL～107cfu/mL（圖4,p<0.001）。表明JH-3具有較強的抑菌....

本文編號：4053457