目的:反復(fù)呼吸道感染（recurrent respiratory tract infection RRTI）是兒童期常見(jiàn)病,其發(fā)病與多種因素有關(guān),而免疫功能狀態(tài)尤受關(guān)注。近年固有免疫系統(tǒng)中的免疫分子L-ficolin與RRTI的關(guān)系研究日益增多。L-ficolin是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物體內(nèi)廣泛存在的寡聚蛋白,有調(diào)理素作用,它包括一個(gè)膠原樣結(jié)構(gòu)域和一個(gè)纖維素樣結(jié)構(gòu)域（fibrinogen-like domain,FBG）。通過(guò)纖維素樣結(jié)構(gòu)域L-ficolin可以和革蘭氏陽(yáng)性及陰性細(xì)菌[如化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌、鼠傷寒沙門氏菌、大腸埃希桿菌]等含有N-乙酰葡糖胺（N-acetylglucosamine GlcNAc）糖配基的微生物結(jié)合,激活MBL-相關(guān)絲氨酸蛋白酶-1、2（MBL-Associated Serine Proteases MASP-1,2）,經(jīng)過(guò)甘露聚糖結(jié)合凝集素（mannan binding lectin MBL）途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng),最終消滅病原體,是人體抵御感染第一道防線中的重要免疫分子。編碼L-ficolin的基因（Ficolin 2 gene FCN2）位于9q34染... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：39 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Ficolin和MBL結(jié)構(gòu)示意圖

51.2.2.1 堿基淬滅探針技術(shù)：堿基淬滅探針技術(shù)的設(shè)計(jì)方案見(jiàn)圖2。探針5’或3’末端標(biāo)記熒光基團(tuán)6-羧基熒光素(6-carboxyfluorescein, FAM)。FAM標(biāo)記在5’端時(shí)，探針3’端需用磷酸基團(tuán)封閉（表2）。當(dāng)PCR結(jié)束時(shí)，由于堿基淬滅探針與靶DNA序列在較低溫度條件下（如30oC）雜交，F(xiàn)AM發(fā)出的熒光被鄰近的堿基（A,T,C或G）淬滅（圖2a）；當(dāng)溫度緩慢升高時(shí)，探針融解脫離靶DNA，從而導(dǎo)致熒光突然大量增加（圖2b）。熒光增量變化最大時(shí)的溫度即為解鏈溫度（melting temperature TM）。靶序列基因未發(fā)生突變（野生型），與探針完全結(jié)合，解離時(shí)所需溫度較高（TM值較大）；靶序列基因發(fā)生突變（突變型），與探針結(jié)合欠緊密，解離時(shí)所需溫度較低（TM值較�。�

值較大）；靶序列基因發(fā)生突變（突變型），與探針結(jié)合欠緊密，解離時(shí)所需溫度較低（TM值較小），因此突變型基因的TM值與野生型基因的TM值明顯不同，由此將不同基因型區(qū)分開(kāi)來(lái)。根據(jù)溫度-實(shí)際熒光增量變化值所繪圖如圖3，該圖不能形象的反應(yīng)上述變化，于是我們采用熒光強(qiáng)度對(duì)溫度的一次負(fù)倒數(shù)[-d(F1)/dT]圖 2 堿基淬滅探針技術(shù)檢測(cè) SNP 原理圖光熒溫度圖 3 溫度-熒光增量變化圖


本文編號(hào)：2915924