發(fā)布時間：2024-05-11 03:21

　　蛋白質(zhì)化學(xué)合成能夠在原子尺度上操控多肽/蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),獲得其他方法難以獲取的蛋白質(zhì)樣品,例如D型蛋白質(zhì)、非天然結(jié)構(gòu)的多肽/蛋白質(zhì)以及位點特異性的翻譯后修飾蛋白質(zhì)等,其已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、生物物理和生物醫(yī)學(xué)等研究領(lǐng)域。目前,使用化學(xué)合成方法已經(jīng)制備了大量重要的水溶性蛋白,例如翻譯后修飾核小體、糖基化促紅細胞生成素(EPO)和鏡像DNA聚合酶等。除了水溶性蛋白,膜蛋白也重要,它參與很多重要的生理進程,包括信號傳導(dǎo)、分子運輸、酶催化、免疫響應(yīng)和細胞凋亡等,是重要的藥物作用靶標。但合成獲取的膜蛋白卻很少,這是因為膜蛋白非常疏水,因此它的化學(xué)合成非常困難。為了促進膜蛋白的化學(xué)合成,科學(xué)家們發(fā)展了一系列新方法和新策略,包括外加增溶試劑、提高溫度和修飾可脫除增溶標簽(特別是可脫除骨架修飾(Removable Backbone Modification,RBM)策略)等。值得一提的是,RBM 策略通過在主鏈骨架上安裝增溶標簽后,可使跨膜肽/膜蛋白的性質(zhì)跟水溶性蛋白類似,易于其分析、分離、連接和質(zhì)譜表征等,實現(xiàn)了中小型膜蛋白的高效制備。盡管目前膜蛋白化學(xué)合成已有不少研究進展,但其仍存在許多問題有待解決...

【文章頁數(shù)】：211 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 化學(xué)合成膜蛋白的研究進展
    1.1 引言
    1.2 外部因素
        1.2.1 溫度
        1.2.2 pH
        1.2.3 溶劑
        1.2.4 鹽類
        1.2.5 去垢劑
        1.2.6 離子液體
    1.3 內(nèi)部修飾:主鏈酰胺鍵保護基
        1.3.1 偽脯氨酸
        1.3.2 異肽
        1.3.3 鄰羥基芐基結(jié)構(gòu)
        1.3.4 鄰巰基芐基結(jié)構(gòu)
        1.3.5 甲氧基芐基結(jié)構(gòu)
        1.3.6 非芐基結(jié)構(gòu)
    1.4 內(nèi)部修飾:短肽增溶標簽
        1.4.1 多肽C端
        1.4.2 多肽N端
        1.4.3 多肽側(cè)鏈
    1.5 內(nèi)部修飾:多肽骨架修飾增溶標簽
        1.5.1 Gly骨架
        1.5.2 任意氨基酸骨架
    1.6 結(jié)果與展望
第2章 通過可移除骨架修飾輔助的絲氨酸連接方法化學(xué)合成天然的S-棕桐�；�膜蛋白
    2.1 研究背景
    2.2 結(jié)果與討論
        2.2.1 直接通過Fmoc SPPS方法化學(xué)合成S-Palm SLN
        2.2.2 發(fā)展RBM^GABA-assisted STL方法用于化學(xué)合成S-Palm SLN
        2.2.3 使用RBM^GABA-assisted STL方法化學(xué)合成S-Palm M2
    2.3 結(jié)論
    2.4 實驗部分
        2.4.1 材料儀器及通用合成策略
        2.4.2 直接通過Fmoc SPPS方法合成S-Palm SLN 1
        2.4.3 通過RBM^GABA輔助的STL反應(yīng)化學(xué)合成S-Palm SLN
        2.4.4 基于RBM^GABA輔助的STL化學(xué)合成S-Palm M2
第3章 使用新的丙二硫醇保護水楊醛的硫縮舅發(fā)展了N-to-C順序的NCL和STL結(jié)合策略
    3.1 研究背景
    3.2 結(jié)果與討論
        3.2.1 SAL-酯或SAL縮氨基脲(SAL~(^SCA_))酯不能用于N-to-C順序的NCL-STL反應(yīng)
        3.2.2 發(fā)現(xiàn)可活化的新的S,S-1,3-丙二硫縮醛(SAL~(^PDT))酯
        3.2.3 使用新發(fā)展的SAL~(^PDT)-ester介導(dǎo)N-to-C順序NCL和STL結(jié)合的連接策略
        3.2.4 使用新的NCL-STL方法化學(xué)合成S-Palm M2離子通道蛋白
        3.2.5 使用新的NCL-STL方法化學(xué)合成S-Palm IFITM3
    3.3 結(jié)論
    3.4 實驗部分
        3.4.1 材料儀器及通用合成策略
        3.4.2 使用N-to-C順序的NCL-STL方法連接模型肽
        3.4.3 發(fā)現(xiàn)新的可活化肽SAL~(^PDT)-ester
        3.4.4 SAL^PDT-ester介導(dǎo)的N-to-C順序的NCL和STL結(jié)合的連接方法
        3.4.5 通過NCL-STL方法化學(xué)合成S-Palm M2
        3.4.6 通過NCL-STL法合成S-palm IFITM3
第4章 不可還原的硫醚鍵替代二硫鍵顯示鐵調(diào)素與其受體膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白間的相互作用無需二硫鍵交換
    4.1 研究背景
    4.2 結(jié)果與討論
    4.3 結(jié)論
    4.4 實驗部分
        4.4.1 材料儀器及合成方法
        4.4.2 S-C鍵和C-S鍵的二氨基二酸的合成
        4.4.3 合成Hepcidin
        4.4.4 合成Hepcidin二硫鍵類似物
        4.4.5 合成minihepcidins
        4.4.6 Ferroportin內(nèi)在化實驗
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的其他研究成果



本文編號：3969448