以40個不同基因型萬壽菊（Tagetes erecta）葉片為外植體,在相同條件下誘導(dǎo)不定芽分化,獲得最佳再生基因型;然后分析不同激素組合、外植體切口方式、固化劑及蔗糖對萬壽菊再生和玻璃化影響;最后對不同類型的伸長培養(yǎng)基進行探索。結(jié)果表明,最佳再生基因型為里程碑·黃色;最佳再生培養(yǎng)基為MS+0.2 mg·L^-1 TDZ+0.5 mg·L^-1 IBA+8 g·L^-1瓊脂+40g·L^-1蔗糖,再生率達70%,玻璃化率降低至16%;最適再生的小葉部位為全小葉;最適伸長培養(yǎng)基為MS+8 g·L^-1瓊脂+30g·L^-1蔗糖,伸長率達91.3%。該研究建立了高效穩(wěn)定的萬壽菊再生體系,解決了萬壽菊再生過程中嚴重的玻璃化問題,可為萬壽菊的遺傳改良和基因功能研究奠定基礎(chǔ)。

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【部分圖文】：

圖1 萬壽菊的葉片再生過程

小葉片外植體培養(yǎng)1周后,傷口部位膨大并產(chǎn)生愈傷組織;2周后,葉片愈傷組織已完全形成,不定芽開始分化,且小葉片接觸培養(yǎng)基一端向上翻卷。第2–4周為不定芽快速形成階段,4周后不定芽數(shù)量趨于穩(wěn)定。根據(jù)再生結(jié)果,萬壽菊基因型可分為易再生(≥50%)、中等再生(30%–50%)、難再生(1....

圖2 不同固化劑和蔗糖對萬壽菊里程碑·黃色葉片再生率和玻璃化率的影響

由圖2A,B可知,不同類型及濃度的固化劑對萬壽菊葉片再生率影響不明顯,但對不定芽玻璃化有顯著影響。植物凝膠和瓊脂濃度越低,玻璃化現(xiàn)象越嚴重,但植物凝膠更易導(dǎo)致不定芽玻璃化。當(dāng)瓊脂濃度為8g·L?1時,萬壽菊再生率最高,達65%,同時不定芽玻璃化率降低至41.55%。且不定芽的狀態(tài)....

本文編號：4023250