牛病毒性腹瀉病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)是引起牛呼吸道綜合征、繁殖障礙性疾病、腹瀉/黏膜病、免疫抑制和持續(xù)性感染的重要病原,給全球養(yǎng)牛業(yè)造成了巨大的損失。PCR檢測技術是目前檢測BVDV的主流手段。盡管目前已建立的BVDV PCR檢測方法很多,但未見適用于臨床現場檢測BVDV的PCR檢測方法及試劑盒,制約了BVDV的快速診斷和檢疫。本研究的目的是基于恒溫隔絕式熒光RT-PCR(Insulated isothermal RT-PCR,ii RT-PCR)技術,研制檢測BVDV1型的試劑盒,并應用試劑盒進行BVDV1型現場診斷及流行病學調查。并取得了以下成果:1.BVDV1型恒溫隔絕式熒光RT-PCR檢測試劑盒研制及應用為了研制能現場檢測BVDV1型的熒光RT-PCR檢測試劑盒,對GenBank中下載的54條BVDV1型、43條BVDV2型、11條BVDV3型5’UTR序列進行分析后,設計了特異性檢測BVDV1型的引物:BVDV1 iiF:5’-AAGCC-TCGAGATGCCACG-3’,BVDV1 iiR:5’-GCAGCACCCTATCAG...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1BVDV基因組及其編碼蛋白圖

整個基因組由三個部分組成，可分為5'端非編碼區(qū)（5'untranslatedregion,5'UTR）、開放閱讀框架區(qū)（openreadingframe,ORF）和3'端非編碼區(qū)（3'untranslatedregion,3'UTR）（如圖1）（Colett....

圖350條BVDV5'UTR序列鄰近法遺傳進化樹

12圖350條BVDV5'UTR序列鄰近法遺傳進化樹Fig.3Neighbor-joiningconsensustreefor505'UTRsequenceofBVDV

圖4BVDV1型5'UTR全基因鄰近法進化樹

13圖4BVDV1型5'UTR全基因鄰近法進化樹Fig.4Neighbor-joiningconsensustreefor5'UTRfull-geneticofBVDV1

圖5BVDV2型5'UTR全基因鄰近法進化樹

14圖5BVDV2型5'UTR全基因鄰近法進化樹Fig.5Neighbor-joiningconsensustreefor5'UTRfull-geneticofBVDV2

本文編號：4004651