目的研究微小RNA-195（miR-195）調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）誘導(dǎo)的大鼠肝星狀細(xì)胞（HSC-T6）活化與Smad7表達(dá)的關(guān)系。方法體外培養(yǎng)HSC-T6,用5 ng·mL^-1TGF-β1作為刺激因子,模擬大鼠肝纖維化模型。將細(xì)胞分為6組:對照組、模型組（TGF-β1組）、miR-195 mimic實驗組、miR-195 mimic NC實驗組、miR-195 inhibitor實驗組及miR-195 inhibitor NC實驗組。分別用5 ng·mL^-1TGF-β1處理HSC-T6細(xì)胞24,48,72 h后,以實時熒光定量PCR法檢測miR-195、Smad7及α-SMA mRNA表達(dá),以免疫印跡法檢測Smad7蛋白表達(dá)。結(jié)果在TGF-β1誘導(dǎo)下,miR-195的表達(dá)隨時間逐漸升高、α-SMA表達(dá)逐步上調(diào)而Smad7表達(dá)呈降低趨勢,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01,P<0.01;P<0.05）。與模型組比較,miR-195 mimic能促進(jìn)TGF-β1誘導(dǎo)的HSC-T6活化,升高miR-195、α-SMA...

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【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實驗方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)[3]
        2.2 細(xì)胞分組與處置
        2.3 細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染[5]
        2.4 用實時熒光定量PCR (Real-time PCR) 法測定mRNA[5]
        2.5 以免疫印跡法測定蛋白表達(dá)水平[5]
    3 統(tǒng)計分析
結(jié)果
    1TGF-β1對HSC-T6中miR-195、Smad7及α-SMA mRNA表達(dá)的影響
    2瞬時轉(zhuǎn)染miR-195 mimic及inhibitor對TGF-β1誘導(dǎo)的miR-195、Smad7及α-SMAmRNA表達(dá)變化的影響
    3 轉(zhuǎn)染miR-195 mimic及inhibitor對TGF-β1誘導(dǎo)的Smad7蛋白表達(dá)變化的影響
討論



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