目的研究血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）調(diào)控小鼠成骨細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制。方法用10^-6 mol/L Angn刺激小鼠成骨細(xì)胞24 h,利用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)檢測成骨細(xì)胞凋亡情況。并將成骨細(xì)胞分為4組,對照組（α-MEM培養(yǎng)基處理細(xì)胞1 h）;AngⅡ組(10^-6 mol/L AngⅡ處理細(xì)胞1 h);AngⅡ+SP600125組[使用c-Jun氨基末端激酶（JNK）通路抑制劑（SP600125）預(yù)處理細(xì)胞1 h,再用AngⅡ處理1h];AngⅡ+vehicle組（加入對應(yīng)量的二甲基亞砜預(yù)處理1 h,再用Angn處理細(xì)胞1 h）。利用免疫印跡法檢測凋亡信號通路相關(guān)蛋白（Bax、Bcl-2、細(xì)胞色素C）及應(yīng)激活化蛋白激酶（SAPK）/JNK信號通路的表達(dá),同時(shí)使用試劑盒檢測Caspase-3活性。結(jié)果 10^-6 mol/L AngⅡ處理后,成骨細(xì)胞凋亡數(shù)目增加2倍,同時(shí)細(xì)胞內(nèi)SAPK/JNK通路活化,Bcl-2表達(dá)明顯降低,Bax表達(dá)明顯增加,細(xì)胞色素C從細(xì)胞核內(nèi)向細(xì)胞質(zhì)內(nèi)轉(zhuǎn)移增加,Caspase-3活性明顯增加,而使用SP60...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 儀器與試劑
    1.2 方法
        1.2.1 小鼠成骨細(xì)胞體外培養(yǎng)及處理
        1.2.2 TUNEL染色
        1.2.3 對JNK信號通路相關(guān)蛋白的檢測
        1.2.4 對凋亡信號通路相關(guān)蛋白的檢測
        1.2.5 Caspase-3活性測定
    1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 AngⅡ?qū)π∈蟪晒羌?xì)胞凋亡的影響
    2.2 AngⅡ?qū)�JNK信號通路的影響
    2.3 AngⅡ處理對成骨細(xì)胞凋亡Bcl家族蛋白的影響
    2.4 AngⅡ處理對成骨細(xì)胞色素C釋放的影響
    2.5 AngⅡ處理對成骨細(xì)胞Caspase-3活性的影響
3 討論



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