目的:探討白樺脂醇對人胃癌MGC-803細(xì)胞增殖和凋亡的影響。方法:CCK-8試劑盒檢測不同濃度白樺脂醇對細(xì)胞活性的影響;Western blot檢測細(xì)胞中Ki67和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)水平;流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞凋亡情況;Western blot檢測細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/磷酸化蛋白激酶B(AKT)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:白樺脂醇濃度低于50μmol/L時,對細(xì)胞活性沒有顯著影響;不同濃度白樺脂醇處理人胃癌MGC-803細(xì)胞后,細(xì)胞增殖倍數(shù)顯著降低;細(xì)胞中Ki67和PCNA的表達(dá)水平顯著降低;發(fā)生凋亡的細(xì)胞比率顯著增加,細(xì)胞中Bcl-2表達(dá)水平顯著降低,Bax、Cleaved caspase-9和Cleaved caspase-3表達(dá)水平顯著升高;細(xì)胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比率顯著降低,p65和mTOR表達(dá)水平顯著降低,上述作用均具有白樺脂醇劑量依賴效應(yīng)。結(jié)論:白樺脂醇抑制胃癌MGC-803細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,其作用機(jī)制可能與抑制PI3K/AKT通路激活相關(guān)。

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圖2 CCK-8檢測白樺脂醇對MGC-803細(xì)胞增殖的影響

圖1白樺脂醇分子式及不同濃度白樺脂醇對MGC-803細(xì)胞活性的影響2.6白樺脂醇對PI3K/AKT通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響

圖3 Western blot檢測白樺脂醇對增殖相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

不同濃度白樺脂醇處理胃癌細(xì)胞后,細(xì)胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT的比率降低,NF-κBp65和mTOR表達(dá)水平降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。上述變化具有白樺脂醇劑量依賴性,見圖6。圖4流式細(xì)胞術(shù)檢測白樺脂醇對MGC-803細(xì)胞凋亡的影響

圖4 流式細(xì)胞術(shù)檢測白樺脂醇對MGC-803細(xì)胞凋亡的影響

圖3Westernblot檢測白樺脂醇對增殖相關(guān)蛋白表達(dá)的影響圖5Westernblot檢測白樺脂醇對MGC-803細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

圖5 Western blot檢測白樺脂醇對MGC-803細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

圖4流式細(xì)胞術(shù)檢測白樺脂醇對MGC-803細(xì)胞凋亡的影響圖6Westernblot檢測PI3K/AKT通路相關(guān)蛋白的表達(dá)水平

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