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HEATR1基因與胃癌細胞增殖的相關性研究

發(fā)布時間:2020-12-04 04:36
  目的:運用一株胃癌細胞AGS,將其分為shCtrl(對照組)及shHEATR1(目標組),運用細胞功能學實驗檢測HEATR-1(HEATR repeat containing-1)基因對于腫瘤細胞增殖的相關作用,當其在慢病毒感染并敲除目的基因后,觀察正常兩組之間的細胞增殖是否受到抑制。方法:根據(jù)在基因庫中檢索HEATR-1的mRNA核苷酸序列,設計、目的基因慢病毒載體構建。培養(yǎng)生長狀態(tài)良好的目的細胞,依據(jù)相關要求設計好實驗條件后進行病毒感染。依據(jù)預實驗確定的感染時間點,在一定熒光條件下顯微觀察GFP表達水平,細胞匯合度達80%左右收集細胞進入下游實驗。經(jīng)聚合酶鏈式反應檢測胃癌細胞株AGS目的基因表示水平,確定高表達后,在慢病毒感染目標組之后行Q-PCR檢測HEATR-1的mRNA表達水平確認敲除效率。并對shCtrl(對照組)及shHEATR1(目標組)行MTT檢測,評估HEATR-1敲除后對細胞增殖功能的影響,探討HEATR-1陽性表達與胃癌組織增殖的關系。結果:對照及目的慢病毒感染目的細胞后72小時于顯微鏡下熒光觀察,觀察結果顯示細胞感染效率達到80%以上細胞狀態(tài)正常。熒光定量PC... 

【文章來源】:皖南醫(yī)學院安徽省

【文章頁數(shù)】:56 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

HEATR1基因與胃癌細胞增殖的相關性研究


HEATR1在兩組胃癌細胞中mRNA敲除量從圖1定量PCR結果可以看出,經(jīng)shRNA慢病毒感染后實驗AGS細胞中HEATR1基因在mRNA水平的表達量受到抑制(p<0.05),敲減效率達到89.5%;

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圖 1 HEATR1 在兩組胃癌細胞中 mRNA 敲除量從圖 1 定量 PCR 結果可以看出,經(jīng) shRNA 慢病毒感染后實驗 AGS 細胞中 HEATR1基因在 mRNA 水平的表達量受到抑制(p<0.05),敲減效率達到 89.5%。


本文編號:2897021

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