本研究使用的乳酸菌菌種均分離自內蒙古錫盟地區(qū)的酸馬奶酒中,第一,使用Spot-on-lawn法在固體培養(yǎng)基上對具有產生抑菌物質潛力的Lactobacillus plantarumHE-1和Enterococcus faecium HE-432進行篩選,同時篩選出用于后續(xù)檢測試驗的最佳指示菌；第二,選用相近或不同種屬乳酸菌作為環(huán)境中的刺激因素,設計14個共培養(yǎng)組合,使用打孔法檢測混菌培養(yǎng)上清液的抑菌性；第三,對于具有抑菌性的混菌培養(yǎng)上清液進行AI-2信號分子檢測,尋找AI-2信號分子產生與發(fā)酵產生抑菌物質二者之間在時間和產生量上的對應關系；第四,對產抑菌物質乳酸菌生物膜生成和群體感應現(xiàn)象二者關系進行探索,為以后將其開發(fā)為腸道益生菌打下基礎；第五,使用分子生物學手段驗證產抑菌物質乳酸菌含有l(wèi)uxS基因片段,輔助證明AI-2信號分子的產生。實驗結果顯示,第一,L. plantarum HE-1產生的抑菌物質對腸球菌、發(fā)酵乳桿菌、植物乳桿菌、乳酸乳球菌、乳酸片球菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌和藤黃微球菌均有不同程度的抑制作用,并選取抑制作用最好的大腸桿菌作為后續(xù)實驗的指示菌。第二,在...

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【學位級別】：碩士

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摘要
Abstract
插圖和附表清單
1 前言
    1.1 乳酸菌抑菌特性概述
        1.1.1 乳酸菌素Nisin的研究概述
        1.1.2 乳酸菌Ⅱ類細菌素的研究概述
    1.2 群體感應現(xiàn)象概述
        1.2.1 種內群體感應系統(tǒng)概述
        1.2.2 由LuxS/AI-2介導的種間群體感應系統(tǒng)概述
    1.3 基于LuxS/AI-2的群體感應系統(tǒng)在乳酸菌共培養(yǎng)中的研究進展概述
        1.3.1 乳酸菌種間共培養(yǎng)中LuxS/AI-2系統(tǒng)調控的QS現(xiàn)象
        1.3.2 乳酸菌與其他種屬菌株或細胞共培養(yǎng)中LuxS/AI-2系統(tǒng)調控的QS現(xiàn)象
    1.4 微生物生物膜生成與LuxS/AI-2的群體感應系統(tǒng)二者之間的關系
    1.5 研究的目的及意義
2 材料與方法
    2.1 儀器與材料
        2.1.1 實驗菌種
        2.1.2 儀器
        2.1.3 藥品試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 菌種保藏、活化和計數(shù)
        2.2.2 Spot-on-lawn抑菌物質檢測法
        2.2.3 乳酸菌共培養(yǎng)方法
        2.2.4 發(fā)酵上清液的制備
        2.2.5 打孔法檢測混菌培養(yǎng)上清液抑菌物質
        2.2.6 AI-2信號分子的檢測及方法優(yōu)化
        2.2.7 生物膜形成的檢測
        2.2.8 DNA的提取與luxS基因的擴增
        2.2.9 同源性分析與系統(tǒng)發(fā)育樹的構建
3 結果與分析
    3.1 Spot-on-lawn法篩選產抑菌物質實驗菌和最佳指示菌
    3.2 共培養(yǎng)中產抑菌物質與AI-2信號分子產生二者的相關關系
        3.2.1 共培養(yǎng)誘導產生抑菌物質
        3.2.2 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的檢測
        3.2.3 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的產生與產抑菌物質二者的相關關系
    3.3 L.plantarum HE-1生物膜形成與AI-2信號分子產生二者的相關關系
    3.4 luxS的擴增及同源性和系統(tǒng)發(fā)育分析
4 討論
    4.1 Spot-on-lawn法篩選產抑菌物質實驗菌和最佳指示菌
    4.2 共培養(yǎng)中產抑菌物質與AI-2信號分子產生二者的相關關系
        4.2.1 共培養(yǎng)誘導產生抑菌物質
        4.2.2 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的檢測
        4.2.3 共培養(yǎng)中AI-2信號分子的產生與產抑菌物質二者的相關關系
    4.3 L.plantarum HE-1生物膜形成與AI-2信號分子產生二者的相關關系
    4.4 luxS的擴增及同源性和系統(tǒng)發(fā)育分析
5 結論
致謝
參考文獻
附錄
作者簡介



本文編號：4013142