與傳統(tǒng)的光學顯微成像技術相比,熒光顯微成像技術的信噪比更高,且具有較強的特異性,因此得到了更為廣泛的應用。但是熒光顯微成像技術和傳統(tǒng)的光學顯微成像技術一樣,存在著分辨率衍射受限的問題。為了解決這一問題,一系列基于不同原理的超分辨熒光顯微成像技術被提出。其中結構光照明超分辨熒光顯微成像技術(SIM)具有快速成像和低光毒性等優(yōu)點,在細胞生物學研究領域得到了特別的關注。SIM技術使用余弦形式的結構光照明,利用余弦照明條紋的移頻作用實現(xiàn)成像分辨率的提高。數(shù)字微鏡器件(DMD)已經(jīng)被應用在SIM超分辨顯微成像中,然而在使用激光光源時基于DMD的SIM成像系統(tǒng)中存在著激光散斑問題,影響成像效果。因此基于DMD的SIM成像系統(tǒng)一般使用非相干光源。本文提出一種基于MEMS微鏡掃描的消散斑方法,解決了 DMD照明調制中的激光散斑問題,搭建了 DMD照明調制的熒光顯微成像系統(tǒng)。在此基礎上,實現(xiàn)了余弦結構光SIM超分辨顯微成像。利用DMD的數(shù)字可編程特性,對盲SIM顯微成像技術進行了改進,將所需實驗圖像的數(shù)量從幾百到上千減少至幾十,極大地提高了盲SIM的成像效率。對超分辨光學漲落顯微成像(SOFI)技術進行了...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１熒光產(chǎn)生的機理??

?浙江大學碩士學位論文???一種是非輻射形式的能量損耗（例如轉換為熱量），另一種便是直接躍遷至基態(tài)并輻射出光??子，而這一方式所產(chǎn)生的光輻射就稱為熒光。??三二：：：：１１７＾?Ｅ?１?中間振動??激發(fā)態(tài)Ｓｌ?＾?——?Ｔ能級??Ｉ??Ｉ??Ｉ??Ｉ??Ｉ??激發(fā)?熒光?非輻射損....

圖１．３熒光顯黴成像系統(tǒng)的兩種形式??３??

????熒光顯微成像系統(tǒng)按照成像方式可以分為寬場［８］和共聚焦［９］兩種類型。寬場顯微成像??系統(tǒng)通過顯微物鏡和場鏡（ｔｕｂｅ?ｌｅｎｓ）的組合直接將熒光樣品的放大實像成在面探測器的感??光面上，從而獲得樣品的熒光圖像。寬場顯微成像系統(tǒng)中，通常使用同一個顯微物鏡用于??照明和熒光....

圖１．４兩個艾里斑的混疊現(xiàn)象??

多次曝光，因此成像速度較慢。此外，??共聚焦熒光顯微成像系統(tǒng)的視場通常要比寬場熒光顯微成像系統(tǒng)的更校二者各有優(yōu)勢和??劣勢，應根據(jù)實際應用場景的需求進行選擇。??１．２超分辨焚光顯微成像技術??熒光顯微成像技術的分辨率同樣存在著衍射極限。由于衍射效應，樣品上單個熒光分??子的像表....

圖１．５隨機光學重構顯微成像技術（ＳＴＯＲＭ）原理示意圖「１３］??１．３結構光照明超分辨熒光顯微成像技術??

??熒光顯微成像技術的基礎上，使用了余弦狀的結構光照明而不是均勻的寬場照明。利用結??構光的移頻作用并結合后期算法，可以提取出樣品細節(jié)的高頻信息，能夠將分辨率提高至??接近原來的２倍［｜４］。這些超分辨熒光顯微成像技術突破了傳統(tǒng)熒光顯微成像的衍射極限，??在材料科學和生物學等研究....

本文編號：4043257