目的:探討研究早期液體復(fù)蘇治療及早期液體復(fù)蘇聯(lián)合免疫調(diào)節(jié)治療對(duì)嚴(yán)重膿毒癥大鼠腸道微生態(tài)的影響,揭示早期液體復(fù)蘇治療及早期液體復(fù)蘇聯(lián)合免疫調(diào)節(jié)治療對(duì)嚴(yán)重膿毒癥的療效機(jī)理,以及對(duì)嚴(yán)重膿毒癥大鼠腸道微生態(tài)影響的機(jī)制,為闡明嚴(yán)重膿毒癥的發(fā)生發(fā)展機(jī)制提供理論依據(jù),為探索嚴(yán)重膿毒癥治療方案的優(yōu)化奠定基礎(chǔ)。方法:隨機(jī)將80只(200-250g)SD雄性大鼠分成5組:假手術(shù)組(Sham),嚴(yán)重膿毒癥組(CLP),液體復(fù)蘇組(NS),環(huán)磷酰胺組(CTX),液體復(fù)蘇聯(lián)合環(huán)磷酰胺組(NS+CTX)。采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(Cecal ligation and puncture,[CLP])復(fù)制嚴(yán)重膿毒癥模型,假手術(shù)組給予同樣的手術(shù)操作,但不進(jìn)行穿孔及結(jié)扎。判斷及鑒定嚴(yán)重膿毒癥模型復(fù)制成功后,通過腹腔注射生理鹽水(30ml/kg)及環(huán)磷酰胺(10mg/kg)干預(yù)治療。記錄各組大鼠存活時(shí)間及數(shù)量并繪制生存曲線,定量分析各組大鼠生存率。通過熒光示蹤法檢測(cè)各組大鼠門靜脈血中FD-70濃度,定量分析各組大鼠腸道通透性。通過各組大鼠空腸組織切片HE染色,觀察各組大鼠腸道組織損傷程度及炎性浸潤(rùn)情況;并利用TUNEL法,定性及定...

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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英文摘要
英文縮略詞對(duì)照表
前言
    1.膿毒癥治療研究現(xiàn)狀及進(jìn)展
    2.腸道微生態(tài)
    3.腸道微生態(tài)與膿毒癥的發(fā)生發(fā)展機(jī)制
材料與方法
    1. 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 主要購(gòu)買的試劑及公司
        1.3 主要儀器設(shè)備、耗材及公司
        1.4 外科手術(shù)器械
        1.5 主要配制的試劑
    2. 方法
        2.1 嚴(yán)重膿毒癥大鼠模型的復(fù)制、鑒定、實(shí)驗(yàn)分組及生存率計(jì)算
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
            2.1.2 術(shù)前準(zhǔn)備
            2.1.3 模型制備
            2.1.4 模型鑒定
            2.1.5 膿毒癥大鼠干預(yù)藥物注射
        2.2 血液及組織標(biāo)本的獲取
            2.2.1 組織蠟塊包埋
            2.2.2 檢測(cè)動(dòng)脈血?dú)?br>        2.3 大鼠血清炎癥因子檢測(cè)
            2.3.1 準(zhǔn)備試劑
            2.3.2 檢測(cè)程序
            2.3.3 結(jié)果計(jì)算與判斷
        2.4 組織蛋白的提取
        2.5 利用Western Blot技術(shù)檢測(cè)腸道組織Occludin的表達(dá)
            2.5.1SDS－PAGE電泳
            2.5.2 轉(zhuǎn)膜
            2.5.3 免疫反應(yīng)
            2.5.4 圖像分析
        2.6 腸道組織病理切片
        2.7 TUNEL檢測(cè)腸上皮細(xì)胞凋亡(TUNEL凋亡檢測(cè)試劑盒)
        2.8 腸道通透性測(cè)定
        2.9 實(shí)驗(yàn)結(jié)果整理分析，數(shù)據(jù)采集與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.技術(shù)路線
結(jié)果
    3.1 大鼠基本情況
    3.2 大鼠七天生存分析情況
    3.3 各組大鼠緊密連接蛋白表達(dá)情況
    3.4 早期液體復(fù)蘇和環(huán)磷酰胺對(duì)嚴(yán)重膿毒癥后腸上皮細(xì)胞凋亡的影響
    3.5 各組大鼠腸組織病理學(xué)檢測(cè)
    3.6 各組大鼠炎癥因子TNF - a、IL - 6、IL - 10 的表達(dá)水平
    3.7 各組大鼠腸壁通透性檢測(cè)
    3.8 各組大鼠腸絨毛膜長(zhǎng)度改變
    3.9 各組大鼠動(dòng)脈血?dú)夥治銮闆r
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
附件



本文編號(hào)：4049258