抗生素濫用現(xiàn)象頻發(fā),畜禽養(yǎng)殖業(yè)的抗生素使用量占據(jù)世界抗生素產(chǎn)量的很大比重,畜禽養(yǎng)殖過程中大部分抗生素會以其原體或代謝物形式隨尿液和糞便排出。由于抗生素的選擇性壓力造成大量抗生素抗性菌(antibiotic resistance bacteria, ARB)和抗生素抗性基因(antibiotic resistance genes, ARGs)的產(chǎn)生,含抗生素、ARB和ARGs畜禽糞便對于農(nóng)田及周邊土壤的影響,會使得ARGs在環(huán)境中進一步擴散和傳遞,影響環(huán)境中原有的微生物群落結(jié)構(gòu),也給人類健康系統(tǒng)帶來潛在的威脅。四環(huán)素、磺胺、大環(huán)內(nèi)酯類、β-內(nèi)酰胺類和喹諾酮類抗生素是畜禽養(yǎng)殖業(yè)使用最為廣泛的,這幾類耐藥基因的污染問題也更加嚴峻。目前,關(guān)于ARGs污染的研究大多集中于環(huán)境中土壤、水體的檢測及其生態(tài)效應(yīng),而對于堆肥產(chǎn)品及堆肥技術(shù)對ARGs的研究還較少,因此對于堆肥技術(shù)的生態(tài)風(fēng)險問題的探究也更為必要。豬糞是ARGs的重要來源之一,實驗用鋸末和茶葉渣分別作為輔料與豬糞混勻后,簡稱SS堆和ST堆,進行條垛堆置,利用熒光定量PCR法對不同輔料堆肥過程中5類典型ARGs進行了定量分析,并采用PLFA法對堆...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 抗生素概述及畜禽養(yǎng)殖中抗生素的研究現(xiàn)狀
        1.1.1 抗生素概述
        1.1.2 畜禽養(yǎng)殖中常用的抗生素
        1.1.3 抗生素濫用的危害
    1.2 抗生素抗性基因
        1.2.1 抗生素抗性基因概述
        1.2.2 ARGs的抗性機制
        1.2.3 環(huán)境中ARGs的來源、傳播和歸宿
    1.3 減輕畜禽養(yǎng)殖廢棄物中抗生素抗性基因的研究進展
        1.3.1 人工濕地
        1.3.2 紫外光解
        1.3.3 厭氧消解
        1.3.4 好氧堆肥
    1.4 本文研究的內(nèi)容、目的和意義
        1.4.1 研究內(nèi)容
        1.4.2 研究目的
        1.4.3 研究意義
第二章 材料與方法
    2.1 豬糞堆肥實驗設(shè)置、樣品采集及預(yù)處理
    2.2 藥品及試劑
    2.3 儀器設(shè)備
    2.4 堆肥樣品理化指標的測定
    2.5 ARGs的定性檢測
        2.5.1 堆肥樣品預(yù)處理及基因組DNA的提取
        2.5.2 堆肥樣品中ARGs定性檢測
    2.6 ARGs定量測定
        2.6.1 標準質(zhì)粒的制備
        2.6.2 質(zhì)粒濃度的測定
        2.6.3 絕對熒光定量
    2.7 PLFA法堆肥過程中的群落結(jié)構(gòu)變化
        2.7.1 試劑的準備
        2.7.2 磷酸脂肪酸的提取
        2.7.3 氣相色譜儀MIDI檢測
    2.8 數(shù)據(jù)處理與分析
第三章 結(jié)果與討論
    3.1 堆肥過程中主要理化因子的變化
    3.2 堆肥樣品中ARGs定性檢測
    3.3 ARGs熒光定量結(jié)果與分析
        3.3.1 熒光定量結(jié)果可靠性
        3.3.2 堆肥過程中四環(huán)素類抗性基因的變化
        3.3.3 堆肥過程中磺胺類抗性基因的變化
        3.3.4 堆肥過程中大環(huán)內(nèi)酯類抗性基因的變化
        3.3.5 堆肥過程中β-內(nèi)酰胺類抗性基因的變化
        3.3.6 堆肥過程中喹諾酮類抗性基因的變化
        3.3.7 堆肥過程對于ARGs的PCA分析
        3.3.8 堆肥過程對可移動元件基因的影響及其與ARGs的相關(guān)性分析
    3.4 堆肥過程群落結(jié)構(gòu)變化
第四章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
參考文獻
攻讀碩士期間取得的科研成果
致謝



本文編號：4052779