ε-己內(nèi)酯是一種重要的有機化工中間體,可以用于合成聚己內(nèi)酯等高價值聚合物。而由于這些聚合物具有良好的熱塑性、藥物滲透性、生物降解性和成型加工性以及生物相容性和無毒性,使得ε-己內(nèi)酯在材料、環(huán)保、醫(yī)療等領域具有良好的應用前景。目前化學合成ε-己內(nèi)酯的過程較為繁瑣、物耗和能耗高且不環(huán)保,因而選擇高效率、高選擇性特點的生物催化法合成ε-己內(nèi)酯更為綠色和經(jīng)濟。本研究設計了以環(huán)己醇為底物,經(jīng)環(huán)己酮中間產(chǎn)物生產(chǎn)ε-己內(nèi)酯的全細胞合成路線。該過程因醇脫氫酶(alcoholdehydrogenase,ADH)催化環(huán)己醇到環(huán)己酮產(chǎn)生 NADPH,偶聯(lián)環(huán)己酮單加氧酶(cyclohexanone monooxygenase,CHMO)催化環(huán)己酮產(chǎn)ε-己內(nèi)酯過程消耗NADPH,實現(xiàn)該級聯(lián)酶促反應輔因子NADPH自循環(huán)平衡。為了提高該級聯(lián)酶促催化效率,本研究分別考察了不同雙啟動子表達載體(pETDuet和pRSFDuet)對催化效率的影響,研究表明pRSFDuet占優(yōu),以20mM環(huán)己醇為底物,在16h內(nèi)實現(xiàn)ε-己內(nèi)酯轉(zhuǎn)化率達60%,比相同條件下pETDuet為載體高16%。進一步,為了平衡細胞內(nèi)NADPH的產(chǎn)生和...

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?Ｓ－己內(nèi)酯結(jié)構(gòu)式??

?第一章緒論???第一章緒論??１．１ｓ－己內(nèi)酯概述??ｌ．Ｕｓ－己內(nèi)酯結(jié)構(gòu)及性質(zhì)??ｓ－己內(nèi)酯（ｓ－ｃａｐｒｏｌａｃｔｏｎｅ）是一種無色至淡黃色的油狀液體，也是一種具有??高附加值的有機化合物［１］，其分子式為Ｃ６Ｈ１（）０２，結(jié)構(gòu)式見圖１－１，相對分子質(zhì)量??為１１４．１４。....

圖１－２?Ｂａｅｙｅｒ－Ｖｉｌｌｉｇｅｒ反應的氧化機理??

?第一章緒論???以使得用過氧化氫直接氧化環(huán)己醇合成Ｓ－己內(nèi)酯的過程，除了?Ｈ２？外，沒有其??它副產(chǎn)物的合成［１（）］。??Ｒ、。又?Ｒ２?＋??ｒ，ＸＲ２?—＾?ｒ＾，２?’??１?２?＼??ｐｏｓｔｕｌａｔｅｄ?Ｒｉ?〇ｚ??ｆｏｒｍｕｌａ?＞＜??ｗｉｔｈｏｕｔ?ａｎｙ?....

圖１－３環(huán)己烷氧化合成ｓ－己內(nèi)酯的化學方法??

?第一章緒論???以使得用過氧化氫直接氧化環(huán)己醇合成Ｓ－己內(nèi)酯的過程，除了?Ｈ２？外，沒有其??它副產(chǎn)物的合成［１（）］。??Ｒ、。又?Ｒ２?＋??ｒ，ＸＲ２?—＾?ｒ＾，２?’??１?２?＼??ｐｏｓｔｕｌａｔｅｄ?Ｒｉ?〇ｚ??ｆｏｒｍｕｌａ?＞＜??ｗｉｔｈｏｕｔ?ａｎｙ?....

圖１－４?ＢＶＭＯｓ酶催化機理的簡單示意圖??－

ｌｉｇｅｒ氧化法，也是通過所謂得的Ｃｒｉｅｇｅｅ中間體進行，見圖??１－４。ＢＶＭＯ是含有黃素的酶。有催化活性的物質(zhì)是去質(zhì)子化的過黃素，其是由??依賴于ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ的靜止狀態(tài)的（或氧化狀態(tài)的）黃素基團還原和分子氧還原活??化的步驟依次形成。隨后，氧原子親核攻擊底物的羰基形成Ｃｒ....

本文編號：4051863