分析比較了抗壞血酸和β-巰基乙醇兩種抗氧化劑在CTAB法和SDS法中對臺灣榿木DNA提取質量的影響,結果表明:使用CTAB法比較適合臺灣榿木葉片DNA的提取。在抗氧化劑的選擇上,使用兩種抗氧化劑均能發(fā)揮防止DNA褐化的作用,但因β-巰基乙醇使用便捷、效果穩(wěn)定,更適合作為臺灣榿木DNA提取的抗氧化劑。

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圖1 不同濃度-巰基乙醇和抗壞血酸在兩種DNA提取方法提取DNA電泳圖

添加抗壞血酸的樣品在研磨過程中樣品始終保持新鮮青綠色狀態(tài)，水浴45min后仍保持鮮綠色，使用氯仿抽提后的上清液也呈略帶黃綠的澄清液體，最后使用異丙醇沉淀時得到白色且易溶于TE的絮狀DNA沉淀。β-巰基乙醇是在65℃水浴前在離心管中加入后混勻，因此在研磨過程中不可避免的樣品已經(jīng)被氧....

圖2 臺灣榿木6個種源樣品DNA瓊脂糖凝膠電泳圖

一種高效的DNA提取方法在分子生物學中至關重要[9]，通常植物組織富含多糖、多酚類物質，會降低提取到的DNA質量從而影響后續(xù)PCR擴增的結果[10]。CTAB可以有效去除多糖，SDS雖可有效去除蛋白質但對多糖多酚不能有效去除[11]，本研究發(fā)現(xiàn)使用兩種方法結果差異不大。SDS法提....

圖3 引物QR82在6個臺灣榿木種源樣品中SSR-PCR擴增結果

圖2臺灣榿木6個種源樣品DNA瓊脂糖凝膠電泳圖植物葉片中的多糖、多酚等次生物質會在DNA沉淀時附著在DNA上形成難溶于TE的膠狀沉淀或是發(fā)生褐變[13,14]。使用抗氧化劑可以避免植物樣品發(fā)生褐變以去除多酚類次生物質[15]。本研究結果表明β-巰基乙醇和抗壞血酸都可以在抗氧化上....

本文編號：4057180