第一部分脂聯(lián)素受體在正常SD大鼠乳鼠心肌細胞的分布和表達 目的：研究脂聯(lián)素受體1（AdipoR1）和脂聯(lián)素受體2（AdipoR2）及T-鈣黏蛋白（T-cadherin，T-cad），三種脂聯(lián)素受體在大鼠乳鼠心肌細胞上的分布和表達。 方法： 1.利用酶消化法、差速貼壁法、化學試劑(5-brdu)抑制法培養(yǎng)原代的乳鼠心肌細胞，采用α-肌動蛋白細胞免疫熒光法對培養(yǎng)的心肌細胞進行鑒定，然后在倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)、細胞形態(tài)和其自發(fā)搏動。 2.選用原代培養(yǎng)72～96h的單層原代心肌細胞進行實驗，采用RT-PCR和細胞免疫組織化學法檢測AdipoR1、AdipoR2和T-cadherin的mRNA和蛋白的表達及分布。 結(jié)果： 1.經(jīng)細胞免疫組織化學法鑒定培養(yǎng)的原代細胞為心肌細胞，且其純度可達95%以上； 2.在SD大鼠乳鼠心肌細胞上均檢測到了AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin的mRNA和蛋白表達，其中以AdipoR1和T-cadherin的mRNA和蛋白表達量高，與AdipoR2的表達量相比差異顯著（P<0.01）。 結(jié)論： 1.脂聯(lián)素受體1、脂聯(lián)...

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
前言
第一部分 脂聯(lián)素受體在正常 SD 大鼠乳鼠心肌細胞上的分布和表達
    1 材料與方法
        1.1 心肌細胞的培養(yǎng)
        1.2 鑒定心肌細胞
        1.3 正常單層細胞進行實驗
        1.4 觀察指標
        1.5 統(tǒng)計學處理
    結(jié)果
        1.6 細胞的形態(tài)特征、鑒定
        1.7 RT-PCR 檢測 AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的 mRNA 表達結(jié)果
        1.8 免疫組織化學方法檢測 AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的蛋白表達結(jié)果
    討論
第二部分 脂聯(lián)素對心肌細胞缺氧/復氧損傷后 AdipoR1、AdipoR2 及 T-cadherin 表達的影響
    2 材料與方法
        2.1 心肌細胞的培養(yǎng)
        2.2 乳鼠心室肌細胞的原代培養(yǎng)及鑒定
        2.3 實驗分組情況
        2.4 觀察指標和檢測方法
        2.5 統(tǒng)計學處理
    結(jié)果
        2.6 倒置相差顯微鏡下細胞形態(tài)觀察：
        2.7 各實驗組細胞上清液中 LDH 釋放量比較
        2.8 心肌細胞凋亡率
        2.9 TUNEL 法檢測心肌細胞凋亡結(jié)果
        2.10 RT-PCR 檢測 AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的 mRNA 表達
        2.11 Western blot 檢測 AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的蛋白表達
    討論
結(jié)論
參考文獻
附圖
綜述
    參考文獻
個人簡介
致謝



本文編號：4049427