奶牛酮病是以能量負平衡、脂肪動員、肝臟脂肪沉積過多為病理學基礎,以高血酮、高血脂和低血糖為主要血液生化特征的常見、多發(fā)性營養(yǎng)代謝性疾病。肝臟作為酮體生成、糖異生以及脂類代謝的器官,在奶牛發(fā)生酮病時受到較大的損傷,在應激作用下會導致急性期蛋白的分泌。作為主要由肝臟生成的結(jié)合珠蛋白(haptoglobin, HP)以及淀粉樣蛋白A (serum amyloid A, SAA)是十分重要的急性期反應蛋白,在酮病發(fā)生時,由于應激性刺激因素的作用,該蛋白會受到較大影響,因此研究酮病發(fā)生時HP以及SAA的變化,對于揭示奶牛酮病的發(fā)病機理以及機體免疫狀態(tài)具有重要的意義。 本研究首先從GenBank中查找奶牛的HP、SAA以及(3-actin基因序列,利用Primer Express5.0軟件設計PCR引物,分別擴增出可用于基因表達水平定量的目的片段,成功建立了HP以及SAA基因的熒光定量PCR檢測方法。 通過體外犢牛肝細胞的原代培養(yǎng)實驗,于培養(yǎng)72h后添加不同濃度的NEFA以及BHBA,向培養(yǎng)液中添加不同濃度的外源性刺激因子NEFA (0、0.6、1.2、2.4mM)、 BHBA (0、0...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻綜述
    第一章 奶牛酮病的研究進展
        1.1 發(fā)病機制
        1.2 奶牛酮病的病因?qū)W
        1.3 臨床病理學
        1.4 現(xiàn)代臨床診療技術(shù)
        1.5 治療
        1.6 預防
    第二章 急性期反應蛋白HP以及SAA的研究進展
        2.1 結(jié)合珠蛋白的研究進展
        2.2 血清淀粉樣蛋白A的研究進展
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 酮病和健康奶牛血清中觸珠蛋白和血清淀粉樣蛋白A濃度的比較研究
        1.1 材料與方法
        1.2 結(jié)果
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    第二章 NEFA、BHBA對體外培養(yǎng)牛肝細胞的HP和SAA mRNA表達的影響研究
        2.1 材料與方法
        2.2 結(jié)果
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
    第三章 NEFA、BHBA對體外培養(yǎng)牛肝細胞的HP和SAA蛋白濃度的影響研究
        3.1 材料與方法
        3.2 結(jié)果
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
作者簡介
致謝
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本文編號：4054963