羊毛品質(zhì)主要由羊毛纖維的特性決定,羊毛纖維由角質(zhì)層、皮質(zhì)和髓質(zhì)組成,其中皮質(zhì)部表達(dá)的基因?qū)ρ蛎w維的性狀有重要影響,KAP13-1基因在綿羊毛囊皮質(zhì)部表達(dá),且影響毛纖維的細(xì)度。本課題組在前期研究中構(gòu)建了具有在毛囊皮質(zhì)部特異表達(dá)的綿羊KAP11-1啟動子并制備了毛囊皮質(zhì)部特異表達(dá)綿羊KAP13-1和綠熒光蛋白ZSG的轉(zhuǎn)基因小鼠,命名為pKAP11-1-sKAP13-1-2A-ZSG-Plus（簡稱Plus小鼠）,初步鑒定發(fā)現(xiàn)Plus小鼠的毛纖維細(xì)度與野生型相比變細(xì)了。本研究在此基礎(chǔ)上對Plus小鼠進行了三個世代（G2-G4代）的傳代交配,首先分析Plus小鼠外源基因遺傳和表達(dá)的穩(wěn)定性,并對Plus小鼠毛囊表型進行檢測,最后通過生物信息學(xué)預(yù)測、EMSA、免疫熒光等技術(shù)鑒定能夠與KAP11-1啟動子結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子,并在不同的綿羊群體中對轉(zhuǎn)錄因子NFAT5進行了SNP篩選。主要的研究結(jié)果如下:1、Plus小鼠外源基因表達(dá)的穩(wěn)定性檢測（1）利用基因組步移技術(shù)鑒定發(fā)現(xiàn)Plus小鼠外源基因插入在小鼠17號染色體Ermard基因和delta-like protein 1 precursor基因之間的基因...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1毛囊結(jié)構(gòu)示意圖（Xinetal2018）

毛囊皮質(zhì)部特異表達(dá)綿羊KAP13-1轉(zhuǎn)基因小鼠的鑒定外根鞘（ORS）、伴侶層（companionlayer）、內(nèi)根鞘和鞘小皮、毛干（hairshaft）（PausandFoitzik2004,F可分為上下兩個部分，上半部分可分為漏斗部（infun，漏斗部的末端與峽....

圖1-2毛囊的形態(tài)發(fā)生和結(jié)構(gòu)（DuvergerandMorasso2009）

圖1-2毛囊的形態(tài)發(fā)生和結(jié)構(gòu)（DuvergerandMorasso2009）Fig1-2Hairfolliclemorphogenesisandstructure(DuvergerandMorasso2009)毛囊的誘導(dǎo)和形成過程受真皮細(xì)胞和表皮干細(xì)胞....

圖3-1Plus小鼠GenomeWalkingA：5’側(cè)翼序列擴增；B：3側(cè)翼序列擴增；1、2、3分別為第一次巢式PCR、第二次巢式PCR、第三次巢

3結(jié)果3.1Plus小鼠遺傳穩(wěn)定性鑒定3.1.1Plus小鼠外源基因插入位點鑒定本實驗室前期已經(jīng)成功構(gòu)建了pKAP11-1-sKAP13-1-2A-ZSG-Plus轉(zhuǎn)基因小鼠（簡稱Plus小鼠）并確證了毛發(fā)具有綠熒光的Plus小鼠為轉(zhuǎn)KAP13-1基因陽....

圖3-2外源基因sKAP13-1-2A-ZSG序列插入位置示意圖

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2019屆碩士研究生學(xué)位（畢業(yè)）論文司測序。將測序結(jié)果與小鼠的基因組序列進行比對，確定Plus小鼠外源基因sKAP13-1-2A-ZSG在小鼠基因組上的插入的位置。比對結(jié)果發(fā)現(xiàn)外源基因sKAP13-1-2A-ZSG有兩處插入位點，分別在17號染色體E....

本文編號：4055716