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牛病毒性腹瀉病毒單克隆抗體的制備與雙抗夾心ELISA方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2025-07-07 04:56
  牛病毒性腹瀉(Bovine viral diarrhea,BVD)又稱(chēng)為粘膜病(Mucosal disease,MD),是由牛病毒性腹瀉病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)引起,臨床癥狀主要為精神沉郁、流涎、產(chǎn)奶量下降甚至停奶、腹瀉和結(jié)膜炎等,孕牛出現(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)出畸形胎兒或產(chǎn)出持續(xù)感染(PI)牛,新生犢牛因嚴(yán)重腹瀉而死亡。PI牛一生持續(xù)帶毒并不斷持續(xù)向外界排毒,是BVDV最主要的傳染源。牛病毒性腹瀉流行范圍廣,給全球養(yǎng)牛業(yè)造成了巨大的損失。BVDV的E0蛋白是最保守的結(jié)構(gòu)蛋白之一,能被分泌到細(xì)胞外,樣品不用做任何處理就能用抗原捕獲ELISA(ACE-ELISA)檢測(cè),具有重要的診斷價(jià)值;E2是BVDV的主要保護(hù)性抗原;p80蛋白結(jié)構(gòu)保守,針對(duì)p80的單抗能區(qū)分出動(dòng)物是疫苗免疫還是自然感染的,可以用于鑒別診斷,有利于BVDV的凈化。目前國(guó)外開(kāi)發(fā)的抗原捕獲ELISA(ACE)具有良好的敏感性、特異性和可重復(fù)性,可以用于檢測(cè)BVDV的抗原,是一種操作簡(jiǎn)單且經(jīng)濟(jì)的可以檢測(cè)PI牛的方法。目前我國(guó)尚缺乏可用的特異性良好的針對(duì)BVDV的p80、E0及E2蛋白的單克隆抗...

【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2.1BVDV純化后電鏡結(jié)果

圖2.1BVDV純化后電鏡結(jié)果

1:8依次倍比稀釋至1:1024,每個(gè)稀釋度稀l的含100TCID50/100μl的病毒稀釋液,混勻細(xì)胞培養(yǎng)板板中,100μl/孔,每個(gè)稀釋度做培養(yǎng),每天觀察細(xì)胞變化。異性檢測(cè)V3、IBRV包被ELISA板,將單克隆抗體按1:鑒定單抗的特異性。瘟病毒交叉反應(yīng)的....


圖2.2病毒純化前后的TCID50測(cè)定結(jié)果

圖2.2病毒純化前后的TCID50測(cè)定結(jié)果

學(xué)位論文第二章牛病毒性腹瀉病BVDV病毒粒子負(fù)染后,經(jīng)透射電鏡觀察可看到完整的帶粒子直徑為40nm-60nm左右,與純化前的電鏡觀察對(duì)比,該....


圖2.3病毒純化前后SDS-PAGE結(jié)果

圖2.3病毒純化前后SDS-PAGE結(jié)果

碩士學(xué)位論文第二章牛病毒性腹瀉病毒單表2.1病毒純化前后IDEXX試劑盒測(cè)定結(jié)果Table2.1Determinationofvir....


圖2.4單克隆抗體與接種VEDEVAC毒株的細(xì)胞的IFA鑒定結(jié)果

圖2.4單克隆抗體與接種VEDEVAC毒株的細(xì)胞的IFA鑒定結(jié)果

GHI圖2.4單克隆抗體與接種VEDEVAC毒株的細(xì)胞的IFA鑒定結(jié)果Figure2.4IFAidentificationresultsofmonoclonalantibodiesandVEDEVACinoculatedcells注:A、B、....



本文編號(hào):4056534

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