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無丙種球蛋白血癥BTK基因突變研究

發(fā)布時間:2024-06-28 22:40
  背景X連鎖無丙種球蛋白血癥(XLA)是常見的原發(fā)性免疫缺陷病之一。其致病原因是位于X染色體上的BTK基因突變而導(dǎo)致B淋巴細(xì)胞分化發(fā)育的障礙。目前,尚無研究證實XLA的疾病表型與基因型之間存在明確的相關(guān)性,但是仍然不可否定XLA患者不同的BTK基因突變類型可能是影響疾病嚴(yán)重程度的因素之一。 目的通過對臨床擬診為X連鎖無丙種球蛋白血癥的患者進(jìn)行BTK基因突變分析,就中國大陸XLA患者的地區(qū)分布特點、免疫表型、BTK蛋白表達(dá)水平和BTK基因突變類型及特點等方面進(jìn)行探討,了解中國大陸XLA患者BTK突變的類型及特點,分析基因型和表型之間可能存在的關(guān)系。 方法 1.散射比濁法檢測臨床擬診患者血清免疫球蛋白水平,流式細(xì)胞法檢測外周血T、B淋巴細(xì)胞數(shù)量。 2.使用抗BTK單克隆抗體通過流式細(xì)胞技術(shù)分析細(xì)胞內(nèi)BTK蛋白表達(dá)水平。 3.采用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)獲得患者cDNA。使用8對不同引物分2步擴(kuò)增BTK cDNA, PCR產(chǎn)物測序。突變結(jié)果通過對DNA外顯子相應(yīng)部位擴(kuò)增、測序證實。 結(jié)果 1.經(jīng)臨床和常規(guī)實驗室檢查被擬診為XLA的50例患者均有反復(fù)發(fā)生的細(xì)菌性感染,血清免疫球蛋白及...

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1RNA凝膠電泳條帶

圖1RNA凝膠電泳條帶

圖1RNA凝膠電泳條帶制備:反應(yīng)體系依據(jù)TaKaLa逆轉(zhuǎn)錄管中依次加入下列反應(yīng)物:sx逆轉(zhuǎn)錄緩沖液隨機引物01190PrimerM一MLVRNADEPC處理水,于冰上配制。增儀中37OC15分鐘,u85“C分鐘終組DNA抽提(使用QIAGEN血液


圖1研究對象地區(qū)分布

圖1研究對象地區(qū)分布

本研究中的50例臨床擬診患者中,8例來自上海,6例來自江蘇,12例來自浙江,5例來自江西,5例來自河南,3例來自廣東,2例來自安徽,2例來自山東,2例來自福建,四川、遼寧、黑龍江和內(nèi)蒙古各1例(圖1),1例患者無所屬區(qū)域一記錄。上海江蘇12%才叮10%25%圖1研究對象地區(qū)分布二....



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