SKAP2,也稱SFK家族激酶相關磷酸化蛋白2,是非受體蛋白酪氨酸激酶家族中的一員。有研究報道SKAP2參與調控細胞微絲組裝的一系列重要過程,但SKAP2在卵母細胞成熟過程中的作用機制仍未闡明。本實驗以小鼠卵母細胞為研究對象,探討了 SKAP2在細胞不對稱減數(shù)分裂過程中的表達、定位和相關調控機制。前期結果表明:在減數(shù)分裂GV、GVBD、MI和MII期,SKAP2均有穩(wěn)定表達。通過對處于減數(shù)分裂各個關鍵時期的卵母細胞進行免疫熒光染色實驗,我們發(fā)現(xiàn)SKAP2主要定位在卵母細胞皮質邊緣。細胞松弛素B的干擾處理進一步證實了 SKAP2與微絲在卵母細胞皮質呈現(xiàn)共定位關系。為了進一步探究SKAP2與微絲之間的關系和作用機制,我們通過對卵母細胞顯微注射特異性SKAP2 siRNA來降低SKAP2蛋白的表達水平。結果顯示SKAP2下調引起卵母細胞第一極體排放率下降和胞質分裂失敗。細胞膜和細胞質中的微絲組裝量在下調SKAP2后也降低了。同時敲低SKAP2表達水平還干擾了紡錘體遷移、微絲帽和無皮質顆粒區(qū)的形成,并且影響大多數(shù)卵母細胞減數(shù)分裂周期。與此同時,ARP2和WAVE2的表達和定位在SKAP2下調后也...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１卵母細胞減數(shù)分裂過程示意圖｜Ｕ｜

分裂形成單倍體配子，真正實現(xiàn)了染色體數(shù)目倍性減半。因此保證了卵母細??胞正常受精和母源遺傳物質的穩(wěn)定［４］。??卵母細胞減數(shù)分裂關鍵時期如圖１所示，其間涉及卵母細胞ＤＮＡ、染色體、??細胞核、細胞骨架的變化詳細情況為：??①

圖１．２微絲成核和延長示意圖｜２７１

?在微絲延長過程上，ｆｏｒｍｉｎ蛋白和Ａｒｐ２／３復合體不同，同時ｆｏｒｍｉｎ蛋白始終與微??絲正極端結合，不會產生分支（圖１．２）。??Ａｆｐ２／３?Ａｒｐ２／３?Ｎｕｄｅａｔｉｏｎ??＋?ＮＰＦＳ?ｃｏｍｐｌｅＫ?Ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ?Ｆａｃｔｏｒ?ｆ、??＃?ｗ??Ｒｒｏｆｉ....

圖１．３減數(shù)第一次分裂中期紡錘體遷移和細胞皮質極化｜４４’４５１

當紡錘體遷移到細胞皮質后，皮質極性形成。細胞皮質極化的典型特征還包??括在微帽區(qū)域聚集的Ｒａｃ－ＧＴＰ、Ｍｙｏｓｉｎ?ＩＩ和Ｃｄｃ４２以及微絲帽的下方無皮質顆??粒區(qū)形成［３５，３６］（圖１．３）。相關研究報道，這些遷移到皮質的染色質介導皮質重??組啟動，實驗中微絲帽的形成用ＤＮ....

圖１．４減數(shù)第一次分裂中期紡鍵體示意圖｜Ｓ１｜〇Ｆｉｇｕｒｅｌ．４?Ｓｐｉｎｄｌｅ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｍｅｔａｐｈａｓｅ??ｏｆ?ｏｏｃｙｔｅ?ｍｅｉｏｓｉｓ?Ｉ丨??

?Ｖｅｓｉｃｌｅｓ??Ｐｈｏｓｐｈｏ－ｉｎｙｏｓｉｎ－ＩＩ??圖１．３減數(shù)第一次分裂中期紡錘體遷移和細胞皮質極化｜４４’４５１。Ｆｌｇｕｒｅｌ．３?Ｓｐｉｎｄｌｅ??ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ｉｎ?ｍｅｔａｐｈａｓｅ?ｏｆ?ｏｏｃｙｔｅ?ｍｅｉｏｓｉｓ?Ｉ?ａｎｄ?ｃｏｒｔｉｃａｌ?ｐ....

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