目的通過(guò)建立非高血糖的急性肺損傷（ALI）動(dòng)物模型，觀察胰島素對(duì)肺泡液體清除（AFC）和上皮鈉離子通道（ENaC）表達(dá)的調(diào)控，探討胰島素在ALI中的作用；同時(shí)通過(guò)體外培養(yǎng)肺泡上皮細(xì)胞A549，進(jìn)一步明確在胰島素作用下調(diào)控ENaC可能的信號(hào)通路及作用機(jī)制，為其今后的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)及新思路。方法（1）成年健康的SD大鼠經(jīng)腹腔注射戊巴比妥（50mg/kg）麻醉后，行頸靜脈置管。①胰島素組（LPS+Insulin）：通過(guò)頸靜脈給予脂多糖（LPS）（5mg/kg），在給予LPS前16h，微量泵入胰島素（0.1U/kg/h）；②渥曼青霉素（PI3K阻斷劑）組（LPS+Insulin+Wortmannin）：通過(guò)頸靜脈給予LPS（5mg/kg），在給予LPS前16h，微量泵入胰島素（0.1U/kg/h），同時(shí)在給予LPS前90min，LPS后90min和360min分別靜脈給予渥曼青霉素（0.06mg/kg）。③脂多糖（LPS）組：通過(guò)頸靜脈給予LPS（5mg/kg），在給予LPS前16h，微量泵入等量生理鹽水；④對(duì)照組（Control）：通過(guò)頸靜脈給予等量生理鹽水，并在頸靜脈注射前16h微量... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：106 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

ARDS時(shí)肺泡腔內(nèi)水腫液聚集示意圖

介導(dǎo)的肺水腫清除機(jī)制及治療 ALI/ARDS 提供了理論依據(jù)。綜上，本實(shí)驗(yàn)試圖探究胰島素是否通過(guò) PI3K/Akt 信號(hào)途徑參與調(diào)控 ENaC基 α、β、γ 的表達(dá)，從而影響肺泡上皮鈉離子轉(zhuǎn)運(yùn)及肺水腫液的清除；并探討 PI3K/Akt 信號(hào)通路調(diào)控 ENaC 表達(dá)的可能機(jī)制，有助于更全面地闡明在治療 ALI/ARDS 中的作用機(jī)理，為改善疾病預(yù)后和臨床治療奠定重要的礎(chǔ)，具有極大的臨床指導(dǎo)意義。

膠成像系統(tǒng) 美國(guó) Bio-Rad 公司 Gel Doc20003 方法.1 動(dòng)物模型制備1) SD 大鼠稱重后，用 3%戊巴比妥（50mg/kg）經(jīng)腹腔注射麻醉。2) 大鼠麻醉后將其仰臥于解剖板上，用橡皮筋固定四肢及頭部，盡向后伸展充分暴露頸部，備皮，常規(guī)消毒、鋪巾，術(shù)者戴無(wú)菌3) 切開大鼠皮膚及皮下組織，用血管鉗鈍性逐層分離組織直至頸靜用絲線結(jié)扎頸靜脈遠(yuǎn)心端。4) 在血管上剪一小口，然后將用肝素處理后的腰麻管沿切口方向置約 0.5cm 后結(jié)扎固定，另一端連接微量泵。5) 胰島素以 0.1U/kg/h 劑量微量泵入，對(duì)照組泵入等量生理鹽水。


本文編號(hào)：2915909