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內(nèi)臟脂肪FOXC2表達(dá)調(diào)控與脂肪細(xì)胞分化和胰島素抵抗的關(guān)系及機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2025-06-24 00:00
  [目的]探討FOXC2基因C-512T位點(diǎn)多態(tài)性對(duì)內(nèi)臟脂肪組織中FOXC2蛋白表達(dá)水平的影響,以及在2型糖尿病糖脂代謝及胰島素抵抗中的作用。構(gòu)建FOXC2基因啟動(dòng)子區(qū)C-512T位點(diǎn)野生型和突變型的載體,轉(zhuǎn)染脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,探討在脂肪干細(xì)胞分化中不同胰島素濃度對(duì)FOXC2基因表達(dá)所產(chǎn)生的影響;明確FOXC2啟動(dòng)子區(qū)-512位點(diǎn)多態(tài)性對(duì)脂肪干細(xì)胞分化活性的調(diào)控作用。構(gòu)建FOXC2轉(zhuǎn)錄因子的過(guò)表達(dá)及沉默載體,分析FOXC2對(duì)脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪分化的調(diào)控;分析FOXC2基因的過(guò)表達(dá)與沉默表達(dá)對(duì)胰島素抵抗相關(guān)基因PPARγ、GLUT4、PAI-1和UCP1表達(dá)的調(diào)控。從分子細(xì)胞機(jī)制闡明FOXC2在脂肪細(xì)胞分化中的調(diào)控作用及與胰島素抵抗的關(guān)系和機(jī)制,明確FOXC2表達(dá)是從哪些方面影響胰島素抵抗相關(guān)基因的表達(dá),為2型糖尿病和胰島素抵抗的發(fā)病機(jī)制提供相關(guān)的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。[方法](1)取35例在我院因外科疾病行腹部外科手術(shù)的2型糖尿病及非糖尿病患者的腹部大網(wǎng)膜脂肪組織,用Western-blot方法檢測(cè)脂肪組織中FOXC2蛋白的表達(dá)水平;(2)用PCR-RFLP方法檢測(cè)35例研究對(duì)象外周血FOXC...

【文章頁(yè)數(shù)】:114 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

圖1?H0MA2-IR計(jì)算軟件:輸入血糖及胰島素或C肽濃度即可以得出H0MA2-IR值??

圖1?H0MA2-IR計(jì)算軟件:輸入血糖及胰島素或C肽濃度即可以得出H0MA2-IR值??

避免糖尿病時(shí)胰島素原過(guò)多所造成的影響,這是較H0MA1-IR優(yōu)越之處;OMA1-IR更適用于非糖尿病和糖耐量異常人群。HOMA2-IR的計(jì)算方法非線性公式,很難用手工進(jìn)行計(jì)算。此軟件(目前有2.2版本)可://www.ocdem.OX.ac.uk/網(wǎng)站免費(fèi)下載。將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)輸入該軟....


圖2:?FOXC2基因多態(tài)性電泳圖

圖2:?FOXC2基因多態(tài)性電泳圖

結(jié)果??1?FOXC2基因多態(tài)性和蛋白表達(dá)的結(jié)果??1.1?FOXC2基因C-512T多態(tài)性的電泳圖??用?01-處!^方法,如出現(xiàn)3785?、129匕?、24^?的產(chǎn)物片斷,則為雜合??子CT;如出現(xiàn)129?bp、249?bp的產(chǎn)物片斷,則為基因型CC;如出現(xiàn)378bp的產(chǎn)??....


圖3:FOXC2基因CC基因型測(cè)?

圖3:FOXC2基因CC基因型測(cè)?

子CT;如出現(xiàn)129?bp、249?bp的產(chǎn)物片斷,則為基因型CC;如出現(xiàn)378bp的產(chǎn)??物片斷,則為基因型TT。??12?3?4??均37_???;?,?(?249bp??200bp?:,VL'?….,.r?.,..1::;?'?::,?'..■?.,?/-:'"-';,;'....


圖4:?F0XC2基因TT基因型測(cè)序圖

圖4:?F0XC2基因TT基因型測(cè)序圖

圖4:?F0XC2基因TT基因型測(cè)序圖。圖中箭頭所指TT基因型。??該位置只有一個(gè)紅色的峰,說(shuō)明等位基因是相同的堿基,為純合基因型。??1.2.3雜合突變型(CT)測(cè)序圖??、?乙?\?x????? ̄80?▼?90??A?GAAGACTT?丁?丁??'AM/i?kM?八八??圖5....



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