目的觀察小鼠成骨細胞Wnt5a基因敲除對其骨量及微結構的影響,并通過切除成骨細胞特異敲除Wnt5a雌性小鼠雙側卵巢以建立小鼠絕經(jīng)后骨質疏松癥(postmenopausal osteoporosis,PMOP)模型,探究該基因敲除對PMOP骨丟失的影響。方法將12只8周齡成骨細胞敲除Wnt5a的轉基因小鼠及12只8周齡同窩出生不攜帶Cre的野生型小鼠隨機分成假手術組及去卵巢模型組,即野生型假手術組(WTS組)、野生型模型組(WTM組)、轉基因假手術組(KOS組)、轉基因模型組(KOM組)共4組,每組6只。模型組行雙側卵巢切除術、假手術組行假手術,各組小鼠每周稱量體重。8周后處死并收集標本進行相關檢測,包括輸卵管及子宮重量、體重、腹部脂肪重量及HE染色驗證去卵巢手術是否成功;Micro-CT分析、三點彎曲實驗、HE染色分析骨量、骨微結構及骨生物力學性能;TRAP染色檢測破骨細胞數(shù)量;免疫組織化學染色檢測成熟成骨細胞中Wnt5a、ROR2、OPG、RANKL的表達情況。結果輸卵管及子宮重量、腹部脂肪重量示:WTM組顯著低于WTS組(P<0.05)及KOS組(P<0.05),KOM組...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
引言
第1章 實驗研究
    1.1 材料與方法
        1.1.1 主要實驗材料
        1.1.2 實驗方法
        1.1.3 Micro-CT檢測
        1.1.4 股骨三點彎曲實驗
        1.1.5 HE染色
        1.1.6 TRAP染色
        1.1.7 免疫組織化學染色
        1.1.8 免疫組織化學分析
        1.1.9 數(shù)據(jù)分析
    1.2 實驗結果
        1.2.1 小鼠基因型鑒定結果
        1.2.2 小鼠輸卵管及子宮重量
        1.2.3 小鼠體重
        1.2.4 腹部脂肪重量及HE染色
        1.2.5 Micro-CT相關骨微結構參數(shù)
        1.2.6 小鼠股骨生物力學性能檢測結果
        1.2.7 股骨遠端HE染色
        1.2.8 股骨遠端TRAP染色
        1.2.9 免疫組織化學染色及統(tǒng)計分析
    1.3 討論
        1.3.1 動物模型的選擇
        1.3.2 不同細胞來源的Wnt5a對骨穩(wěn)態(tài)的影響
        1.3.3 成骨細胞相關蛋白表達對骨形成的影響
        1.3.4 Wnt5a對脂代謝的影響
    1.4 本章小結
    1.5 不足與展望
參考文獻
結論
第2章 綜述 非經(jīng)典Wnt信號在骨穩(wěn)態(tài)中的作用
    2.1 骨穩(wěn)態(tài)中的Wnt信號通路
    2.2 Wnt5a在骨穩(wěn)態(tài)重的作用
        2.2.1 Wnt5a對骨形成的影響
        2.2.2 Wnt5a對骨吸收的影響
    2.3 Wnt16對骨穩(wěn)態(tài)的作用及機制
        2.3.1 Wnt16對骨形成的影響
        2.3.2 Wnt16對骨吸收的影響
    2.4 Wnt4在骨穩(wěn)態(tài)重的作用及機制
        2.4.1 Wnt4對骨形成的影響
        2.4.2 Wnt4對骨吸收的影響
    2.5 其他
    2.6 本章結論與展望
    參考文獻
致謝
在學期間研究成果



本文編號：4056084