第一部分：海藻糖對(duì)過表達(dá)ALS相關(guān)毒性蛋白質(zhì)NSC-34細(xì)胞的干預(yù)研究 目的：本研究中，我們采用過表達(dá)ALS疾病相關(guān)蛋白質(zhì)的細(xì)胞為模型觀察海藻糖對(duì)這些毒性蛋白質(zhì)的自噬性降解有無促進(jìn)作用，并觀察其能否減輕這些蛋白質(zhì)對(duì)細(xì)胞帶來的毒性作用。為探索自噬調(diào)控對(duì)ALS病理的影響提供體外實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的方法在NSC-34細(xì)胞系中過表達(dá)WT TDP-43，與家族型ALS相關(guān)的Q331K TDP-43，M337V TDP-43突變蛋白質(zhì)，TDP-43的C末端片段TDP-25和TDP-35，以及人WT SOD1和人突變型SOD1-G93A蛋白質(zhì)。再給予用不同濃度的海藻糖（25mM、50mM和100mM）進(jìn)行干預(yù)。用免疫印跡法檢測(cè)LC3-II及P62這兩種自噬通路的標(biāo)記分子以及各種疾病相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)。觀察海藻糖對(duì)各類細(xì)胞的過表達(dá)蛋白質(zhì)是否有促進(jìn)清除的作用。并應(yīng)用自噬通路的特異性阻斷劑3-MA和wortmannin來進(jìn)一步驗(yàn)證海藻糖的促蛋白質(zhì)降解作用機(jī)制是否在自噬通路上。應(yīng)用自噬通路中自噬體和溶酶體的融合的阻斷劑bafilomycin A1來明確海藻糖的對(duì)LC3-II的上調(diào)作用機(jī)制。...

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮寫
引言
第一部分 海藻糖對(duì)過表達(dá) ALS 相關(guān)毒性蛋白質(zhì) NSC-34 細(xì)胞的干預(yù)研究
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    附圖
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第二部分 海藻糖對(duì) ALS 轉(zhuǎn)基因小鼠突變 SOD1 的自噬性降解及炎癥反應(yīng)的干預(yù)研究
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    附圖
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三部分 海藻糖對(duì) ALS 轉(zhuǎn)基因小鼠病程進(jìn)展及行為學(xué)的干預(yù)研究
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    附圖
    附表
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
綜述 自噬調(diào)控在神經(jīng)變性病中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：4045143