乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus，HBV）相關(guān)的慢性肝病在我國 廣泛流行，是當前危害人民健康最嚴重的傳染病。細胞凋亡參與HBV相 關(guān)肝病的發(fā)病機制，但病毒與肝細胞凋亡的關(guān)系還未完全闡明，究竟是抑 制肝細胞凋亡還是促進肝細胞凋亡，尚無最后結(jié)論。 本實驗通過體外連接HBV（ayw亞型）DNA獲得6.4kb的雙拷貝 DNA片段，然后將其插入pcDNA3載體的EcoR V位點獲得連接；通過 聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）和酶切篩選并驗 證，獲得頭尾串聯(lián)雙拷貝HBV全基因重組真核表達質(zhì)粒，構(gòu)建了HBV全 基因重組真核表達質(zhì)粒。 應(yīng)用脂質(zhì)體介導(dǎo)法，把頭尾串聯(lián)雙拷貝HBV全基因重組真核表達質(zhì) 粒轉(zhuǎn)染肝癌細胞。通過G418篩選，對陽性克隆細胞進行十二烷基硫酸 鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）和Western免疫印跡分析，證明...

【文章頁數(shù)】：32 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
引言
第一部分 HBV全基因重組真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第二部分 HBV全基因在肝癌細胞中的轉(zhuǎn)染與表達
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第三部分 HBV感染與肝細胞凋亡的關(guān)系研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
全文小結(jié)
參考文獻
致謝



本文編號：4037948