[背景與目的]腸易激綜合征(irritable bowel syndrome,IBS)是常見的功能性腸病,其發(fā)病機(jī)制尚不清楚。已提出的有胃腸動(dòng)力異常,內(nèi)臟敏感性改變,腦-腸相互作用、神經(jīng)免疫內(nèi)分泌失調(diào)等機(jī)制,但什么細(xì)胞及分子參與IBS的機(jī)制尚不清楚。細(xì)胞或器官功能的異常必然有其物質(zhì)的基礎(chǔ),蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的基礎(chǔ),本研究應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法,尋找腹瀉型IBS(IBS withdiarrhea,IBS-D)患者和正常人結(jié)腸黏膜的差異表達(dá)蛋白質(zhì),旨在篩選出對(duì)IBS-D發(fā)病起重要作用的蛋白質(zhì),揭示IBS-D的分子機(jī)制。 [材料與方法]IBS-D患者5例,診斷均符合功能性胃腸病羅馬Ⅲ科研診斷標(biāo)準(zhǔn),健康志愿者5例為對(duì)照組。分別在進(jìn)行結(jié)腸鏡檢查時(shí),直視下于盲腸及乙狀結(jié)腸粘膜各活檢4塊;3塊立即置于含0.1%苯甲基磺酰氟的冰鹽水中洗凈,液氮中保存;1塊于福爾馬林溶液中固定,石蠟包埋。將兩部位液氮標(biāo)本等量混合,提取組織總蛋白后,進(jìn)行雙向凝膠電泳。采用銀染法對(duì)凝膠進(jìn)行顯色固定,掃描儀獲取圖像。使用Image Master 2D Elite軟件對(duì)圖像進(jìn)行分析,篩選出在IBS-D組表達(dá)有明顯差異的蛋白質(zhì)點(diǎn);選取...

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1蛋白質(zhì)點(diǎn)的手工編輯

ImageMasterZD原則上在檢測(cè)前不對(duì)圖像作任何處理，在點(diǎn)檢測(cè)完成后消減背景。(3)匹配匹配是2一DE圖像分析中的重要一步。匹配時(shí)首先要?jiǎng)?chuàng)建參考凝膠，參考凝膠一般選擇一組凝膠中的蛋白點(diǎn)數(shù)較多的一張，可以通過改變向量框和搜索框的大小來操縱匹配。由于電泳過程中的一些影響因素的作....

圖19(a)IBs一n組10號(hào)點(diǎn)(b)正常對(duì)照組10號(hào)點(diǎn)

圖19(a)IBs一n組10號(hào)點(diǎn)(b)正常對(duì)照組10號(hào)點(diǎn)1.2實(shí)驗(yàn)儀器及試劑1.2.1儀器:質(zhì)譜分析儀:電噴霧一四級(jí)桿一飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(electricsPrayingioquadruploe一timeofflighi一masssPeetromet仃，ESI一Q一TOF一MS)、....

圖20檢索參數(shù):1號(hào)點(diǎn)Q一TOF圖

圖20檢索參數(shù):TyPeofsearehEnzymeFixedmodifieationsVariablemodificationsMassvaluesProteinMassPePtideMassToleraneeFragmentMassToleraneeMax....

圖21檢索參數(shù):2號(hào)點(diǎn)Q一TOF圖

‘.︹寸0t.，幻盯L5025.C11x‘甘諸不.明和O10001咖M+日20的2陰02780圖21檢索參數(shù):TyPeofsearehEnzymeFixedmodifieationsVariablemodifieationsMassvaluesProteinMas....

本文編號(hào)：4001338