目的:構(gòu)建C1GALT1穩(wěn)定過表達(dá)的MGC-803人胃癌細(xì)胞株,觀察其生物學(xué)特性,旨在探討C1GALT1基因過表達(dá)對(duì)人胃癌細(xì)胞株體外增殖、遷移、侵襲能力及細(xì)胞周期的影響。方法:以人胃癌MGC803細(xì)胞株為研究對(duì)象,構(gòu)建pHBLV-CMV-EF1-Zsgreen1-T2A-puro-h-C1GALT1慢病毒包裝載體,包裝慢病毒,感染MGC803細(xì)胞,Puromycin篩選過表達(dá)h-C1GALT1的MGC-803細(xì)胞株,運(yùn)用Realtime PCR法及Western-blot法檢測C1GALT1 mRNA和C1GALT1蛋白的表達(dá)情況,以轉(zhuǎn)染空載體的胃癌細(xì)胞株為對(duì)照,CCK8法檢測C1GALT1過表達(dá)對(duì)胃癌細(xì)胞株MGC-803增殖能力的影響,劃痕實(shí)驗(yàn)分析對(duì)胃癌細(xì)胞株的遷移能力影響,Transwell實(shí)驗(yàn)分析對(duì)胃癌細(xì)胞株侵襲能力的影響,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期的變化。結(jié)果:1、擴(kuò)大培養(yǎng)后,運(yùn)用有限稀釋法最終挑取出MGC803-C1GALT1-1、MGC803-C1GALT1-2、MGC803-C1GALT1-3三株細(xì)胞。2、Realtime PCR法檢測到h-C1GALT1在MGC803細(xì)胞中有...

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第1章 緒論
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 h-C1GALT1 過表達(dá)慢病毒載體的構(gòu)建
    3.2 pHBLV-CMV-EF1-Zsgreen1-T2A-puro-h-C1GALT1 慢病毒載體的轉(zhuǎn)染
    3.3 Realtime PCR法檢測h-C1GALT1 表達(dá)結(jié)果
    3.4 Western-blot法檢測h-C1GALT1 表達(dá)結(jié)果
    3.5 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.6 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.7 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.8 流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：4042070