海洋石油降解菌的分離鑒定及其在海洋石油污染生物修復(fù)中的應(yīng)用研究
發(fā)布時(shí)間:2025-06-06 05:01
由于全球性廣泛的石油生產(chǎn)、運(yùn)輸、使用和處置,在許多環(huán)境特別是海洋環(huán)境中,石油污染已經(jīng)成為一個(gè)普遍而嚴(yán)重的問(wèn)題。目前,我國(guó)沿海地區(qū)海水含油量已超過(guò)國(guó)家規(guī)定的海水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)2~8倍。本文以原油或柴油為唯一碳源從廈門(mén)近海表層海水樣品中通過(guò)富集篩選得到了2組降解菌群。從柴油富集物中分離得到了2株細(xì)菌,經(jīng)16SrDNA鑒定分別屬于假單胞菌屬(Pseudomonas pseudoalcaligenes,97%)和食烷菌屬(Alcanivorax dieselolei,99%)。從原油富集物中分離得到了7株細(xì)菌,經(jīng)16SrDNA鑒定,分別屬于不動(dòng)桿菌屬(Acinetobacter radioresistens,99%)、生絲單孢菌屬(Hyphomonas johnsonii,99%)、食烷菌屬(Alcanivorax borkumensis,99%)、根瘤菌屬(Mesorhizobium loti,96%)、赤細(xì)菌屬(Erythrobacter flavus,93.58%)、玫瑰桿菌屬(Roseobacter gallaeciensis, 95.81%)和希瓦氏菌屬(Shewanella aquimar...
【文章頁(yè)數(shù)】:80 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 前言
1.1 海洋石油污染的生物修復(fù)
1.1.1 海洋石油污染的現(xiàn)狀與危害
1.1.2 石油在海洋環(huán)境中的降解途徑及歸宿
1.1.3 降解石油的微生物
1.1.4 影響海洋石油烴微生物降解的關(guān)鍵因素
1.1.5 生物修復(fù)在海洋石油污染治理中的應(yīng)用
1.2 細(xì)菌的鑒定分類(lèi)
1.2.1 脂肪酸分析
1.2.2 醌在細(xì)菌分類(lèi)中的作用
1.2.3 DNA 堿基組成(G+C MOL%)分析在分類(lèi)中的應(yīng)用
1.2.4 DNA-DNA 相關(guān)性
1.2.5 RRNA 序列分析
1.3 本研究的目的及意義
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 基本方法
2.3 海洋原油降解菌的富集、分離和鑒定
2.3.1 培養(yǎng)基
2.3.2 原油降解菌的富集、篩選
2.3.3 PCR-DGGE 確定混合菌群中的優(yōu)勢(shì)菌
2.3.4 16SRDNA 的鑒定與系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的構(gòu)建
2.4 原油降解細(xì)菌新種的分類(lèi)
2.4.1 表型分析
2.4.2 細(xì)菌葉綠素A 及類(lèi)胡蘿卜素的檢測(cè)
2.4.3 反相高效液相色譜法測(cè)定基因組DNA 中的G+CMOL%含量
2.4.4 氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定細(xì)菌中脂肪酸
2.4.5 BIOLOG 細(xì)菌鑒定法
2.5 柴油及原油降解菌群的構(gòu)建與優(yōu)化
2.5.1 單菌及混合菌群降解能力的測(cè)定
2.5.2 柴油混合菌群結(jié)構(gòu)變化的監(jiān)測(cè)
2.5.3 原油混合菌群在不同底物中的菌群結(jié)構(gòu)變化
2.6 戶(hù)外水池模擬沙灘原油污染修復(fù)實(shí)驗(yàn)
3 結(jié)果與討論
3.1 海洋石油及柴油降解菌的富集、分離和鑒定
3.1.1 結(jié)果與分析
3.1.2 討論
3.2 兩種原油降解菌新種芳烴赤細(xì)菌(ERYTHROBACTER AROMATIPHILUS)及廈門(mén)玫瑰桿菌(ROSEOBACTER XIAMENGENSIS)的鑒定
3.2.1 結(jié)果與分析
3.2.2 討論
3.3 柴油及原油降解菌群的構(gòu)建
3.3.1 結(jié)果與分析
3.3.2 混合菌群的優(yōu)化
3.3.3 討論
3.4 模擬沙灘原油污染生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)
3.4.1 結(jié)果與分析
3.4.2 討論
小結(jié)和展望
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):4049829
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【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 前言
1.1 海洋石油污染的生物修復(fù)
1.1.1 海洋石油污染的現(xiàn)狀與危害
1.1.2 石油在海洋環(huán)境中的降解途徑及歸宿
1.1.3 降解石油的微生物
1.1.4 影響海洋石油烴微生物降解的關(guān)鍵因素
1.1.5 生物修復(fù)在海洋石油污染治理中的應(yīng)用
1.2 細(xì)菌的鑒定分類(lèi)
1.2.1 脂肪酸分析
1.2.2 醌在細(xì)菌分類(lèi)中的作用
1.2.3 DNA 堿基組成(G+C MOL%)分析在分類(lèi)中的應(yīng)用
1.2.4 DNA-DNA 相關(guān)性
1.2.5 RRNA 序列分析
1.3 本研究的目的及意義
2 材料與方法
2.1 材料
2.2 基本方法
2.3 海洋原油降解菌的富集、分離和鑒定
2.3.1 培養(yǎng)基
2.3.2 原油降解菌的富集、篩選
2.3.3 PCR-DGGE 確定混合菌群中的優(yōu)勢(shì)菌
2.3.4 16SRDNA 的鑒定與系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的構(gòu)建
2.4 原油降解細(xì)菌新種的分類(lèi)
2.4.1 表型分析
2.4.2 細(xì)菌葉綠素A 及類(lèi)胡蘿卜素的檢測(cè)
2.4.3 反相高效液相色譜法測(cè)定基因組DNA 中的G+CMOL%含量
2.4.4 氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定細(xì)菌中脂肪酸
2.4.5 BIOLOG 細(xì)菌鑒定法
2.5 柴油及原油降解菌群的構(gòu)建與優(yōu)化
2.5.1 單菌及混合菌群降解能力的測(cè)定
2.5.2 柴油混合菌群結(jié)構(gòu)變化的監(jiān)測(cè)
2.5.3 原油混合菌群在不同底物中的菌群結(jié)構(gòu)變化
2.6 戶(hù)外水池模擬沙灘原油污染修復(fù)實(shí)驗(yàn)
3 結(jié)果與討論
3.1 海洋石油及柴油降解菌的富集、分離和鑒定
3.1.1 結(jié)果與分析
3.1.2 討論
3.2 兩種原油降解菌新種芳烴赤細(xì)菌(ERYTHROBACTER AROMATIPHILUS)及廈門(mén)玫瑰桿菌(ROSEOBACTER XIAMENGENSIS)的鑒定
3.2.1 結(jié)果與分析
3.2.2 討論
3.3 柴油及原油降解菌群的構(gòu)建
3.3.1 結(jié)果與分析
3.3.2 混合菌群的優(yōu)化
3.3.3 討論
3.4 模擬沙灘原油污染生物修復(fù)實(shí)驗(yàn)
3.4.1 結(jié)果與分析
3.4.2 討論
小結(jié)和展望
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號(hào):4049829
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