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缺失D-ldhA的短乳桿菌工程菌的構(gòu)建及其產(chǎn)1,3-丙二醇發(fā)酵優(yōu)化研究

發(fā)布時間:2025-03-19 22:57
  1,3-丙二醇(1,3-PDO)在工業(yè)上存在廣泛的應(yīng)用,特別是作為新型合成材料聚對苯二甲酸丙二醇酯(PTT)的單體,有著無可替代的作用。全球?qū)?,3-PDO的需求逐年在增加。用生物發(fā)酵方法產(chǎn)1,3-PDO更適應(yīng)時代的發(fā)展,既能增加1,3-PDO的產(chǎn)量,又可做到生產(chǎn)過程低耗能高環(huán)保。本研究為了減少短乳桿菌產(chǎn)1,3-PDO過程中副產(chǎn)物乳酸的產(chǎn)量,提高1,3-PDO產(chǎn)量和甘油轉(zhuǎn)化率,利用同源重組的方法敲除了短乳桿菌的D-ldhA基因。敲除后的短乳桿菌在24 h的乳酸脫氫酶酶活為30.8 U/mL,比原始菌株的酶活下降了34.7%。用2%葡萄糖和2%甘油發(fā)酵,在48 h的乳酸產(chǎn)量為10.07 g/L,比未敲除菌株的乳酸產(chǎn)量下降25.8%;1,3-丙二醇的產(chǎn)量和甘油轉(zhuǎn)化率分別為13.26 g/L和0.78 mol/mol,分別提高了33.33%和19.2%。為了提高1,3-PDO的產(chǎn)量和轉(zhuǎn)化率,對敲除D-ldhA的短乳桿菌的發(fā)酵碳源和氮源進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果顯示短乳桿菌工程菌在葡萄糖或果糖作為甘油發(fā)酵的共碳源時效果最好;而酵母提取物和蛋白胨按等量組合作為氮源效果較好;甘油和葡萄糖按等量各20 g/L發(fā)酵...

【文章頁數(shù)】:79 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 1,3-丙二醇的理化性質(zhì)和生產(chǎn)現(xiàn)狀
    1.2 1,3-丙二醇的用途
    1.3 1,3-丙二醇的生產(chǎn)方法
    1.4 甘油的應(yīng)用及生產(chǎn)狀況
    1.5 短乳桿菌
    1.6 發(fā)酵工藝的優(yōu)化
    1.7 研究目的、意義和內(nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗方法
第三章 結(jié)果和分析
    3.1 D-ldhA敲除
    3.2 CICC6239-dldhA發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化
    3.3 優(yōu)化條件下的分批發(fā)酵和補(bǔ)料分批發(fā)酵
第四章 討論
    4.1 D-ldhA基因敲除及敲除后對短乳桿菌發(fā)酵的影響
    4.2 優(yōu)化CICC6238-dldhA菌株產(chǎn)1,3-丙二醇的發(fā)酵培養(yǎng)基
    4.3 優(yōu)化培養(yǎng)的分批發(fā)酵和分批補(bǔ)料發(fā)酵
第五章 總結(jié)與展望
    5.1 全文總結(jié)
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄一 引物序列
附錄二 基因序列
附錄三 英文縮寫
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致謝



本文編號:4036985

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