發(fā)布時間：2025-05-04 18:05

　　致病菌是一類能感染生物體使其產(chǎn)生疾病的微生物。它們傳播和繁殖迅速,在自然界中廣泛存在,對人類健康造成了諸多危害,嚴重威脅著全球公共衛(wèi)生安全。致病菌感染在發(fā)展中國家以食源性感染為主,而在發(fā)達國家則主要表現(xiàn)為合并感染和醫(yī)院獲得性感染。某些革蘭氏陽性菌是臨床上典型的致病菌,可引發(fā)人類感染甚至導(dǎo)致死亡。因此,開發(fā)簡單快速,靈敏有效的革蘭氏陽性菌檢測方法,對于感染性疾病的預(yù)防和臨床診斷具有重要意義。本文基于抗菌肽Phe¹¹-protonectin對革蘭氏陽性菌的識別作用,結(jié)合化學(xué)發(fā)光和生物發(fā)光分析法建立了兩種檢測革蘭氏陽性菌的新方法。（1）基于抗菌肽Phe¹¹-protonectin功能化磁性微球的生物發(fā)光法檢測革蘭氏陽性菌活菌總量基于抗菌肽Phe¹¹-protonectin對革蘭氏陽性菌的識別作用,建立了一種簡單快速的生物發(fā)光分析法,用于革蘭氏陽性菌活菌的檢測。Phe¹¹-protonectin是基于天然陽離子廣譜抗菌肽protonectin設(shè)計改造的新型抗菌肽,它的選擇性較前體肽大大改善,對革蘭氏陽性菌具有...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
主要縮寫符號對照表
第1章 文獻綜述
    1.1 致病菌及其危害
    1.2 致病菌檢測方法的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 基于微生物培養(yǎng)的傳統(tǒng)方法
        1.2.2 基于核酸的分子生物學(xué)方法
        1.2.3 基于免疫學(xué)的方法
        1.2.4 基于生物傳感器的方法
    1.3 化學(xué)發(fā)光分析法概述及其應(yīng)用
        1.3.1 化學(xué)發(fā)光分析法
        1.3.2 生物發(fā)光分析法
        1.3.3 電致化學(xué)發(fā)光分析法
    1.4 抗菌肽的性質(zhì)及其應(yīng)用
        1.4.1 抗菌肽的性質(zhì)和結(jié)構(gòu)
        1.4.2 抗菌肽與細菌的作用機制
        1.4.3 抗菌肽在細菌檢測方面的應(yīng)用
    1.5 磁性微球的性質(zhì)及其應(yīng)用
    1.6 研究思路及內(nèi)容
第2章 基于抗菌肽Phe¹¹-protonectin功能化磁性微球的生物發(fā)光法檢測革蘭氏陽性菌活菌總量
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 試劑材料
        2.2.2 儀器設(shè)備
        2.2.3 細菌培養(yǎng)和計數(shù)
        2.2.4 Phe¹¹-protonectin的最低抑菌濃度測定
        2.2.5 FITC-phe-Prt的制備
        2.2.6 MBs-phe-Prt的制備
        2.2.7 細菌的染色和熒光顯微鏡成像
        2.2.8 MBs-phe-Prt捕獲細菌的掃描電子顯微鏡表征
        2.2.9 革蘭氏陽性菌活菌的檢測
    2.3 生物發(fā)光法檢測革蘭氏陽性菌活菌的原理
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 Phe¹¹-protonectin的抗菌活性驗證
        2.4.2 Phe¹¹-protonectin與革蘭氏陽性菌的結(jié)合作用分析
        2.4.3 檢測條件的優(yōu)化
        2.4.4 方法的選擇性分析
        2.4.5 革蘭氏陽性菌活菌的檢測
        2.4.6 方法的穩(wěn)定性分析
        2.4.7 實際樣品的檢測
    2.5 結(jié)論
第3章 基于抗菌肽Phe¹¹-protonectin與免疫球蛋白G雙位點識別作用的化學(xué)發(fā)光法檢測金黃色葡萄球菌
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 試劑材料
        3.2.2 儀器設(shè)備
        3.2.3 細菌培養(yǎng)和計數(shù)
        3.2.4 FITC-phe-Prt和 RBITC-IgG的制備
        3.2.5 金黃色葡萄球菌的染色和熒光顯微鏡成像
        3.2.6 ALP-phe-Prt的制備
        3.2.7 金黃色葡萄球菌的檢測
    3.3 雙位點識別的化學(xué)發(fā)光法檢測金黃色葡萄球菌的原理
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 金黃色葡萄球菌夾心復(fù)合物的熒光顯微鏡表征
        3.4.2 檢測條件的優(yōu)化
        3.4.3 方法的選擇性分析
        3.4.4 金黃色葡萄球菌的檢測
        3.4.5 實際樣品的檢測
    3.5 結(jié)論
第4章 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 創(chuàng)新點
    4.3 展望
參考文獻
致謝
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本文編號：4042687