愈傷組織以其繁殖速度快、易于保存等優(yōu)點(diǎn)被認(rèn)為是果樹種質(zhì)資源離體保存的一種方式,然而愈傷組織在組織培養(yǎng)中會(huì)存在許多遺傳變異。轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座激活也被證實(shí)是導(dǎo)致遺傳變異的分子機(jī)制之一,近幾年的研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)座子還參與到了基因組進(jìn)化、基因表達(dá)調(diào)控、逆境響應(yīng)等過(guò)程。研究果樹轉(zhuǎn)座子激活有助于為降低種質(zhì)保存的遺傳變異提供分子基礎(chǔ),有助于為創(chuàng)新種質(zhì)資源提供新方法,有助于為理解果樹芽變提供新思路。本課題檢測(cè)了長(zhǎng)期保存后的柑橘愈傷的體細(xì)胞胚胎發(fā)生能力,利用Transposon Display(TD)、Southern雜交、定量PCR等方法檢測(cè)了長(zhǎng)期保存的柑橘愈傷中轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座活性,同時(shí)探索了誘導(dǎo)轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座激活的因素,主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.長(zhǎng)期繼代保存的伏令夏橙愈傷組織依然保留著體細(xì)胞胚胎發(fā)生能力,本研究所用的9個(gè)長(zhǎng)期繼代的該品種愈傷系材料中6個(gè)具有胚胎發(fā)生能力,經(jīng)流失細(xì)胞儀鑒定,胚狀體能保持原來(lái)的倍性。然而,6個(gè)愈傷系材料的胚狀體中僅有1個(gè)愈傷系能夠生芽。因此長(zhǎng)期繼代保存會(huì)對(duì)柑橘愈傷的體細(xì)胞胚胎發(fā)生能力產(chǎn)生影響。2.TD實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:在長(zhǎng)期保存柑橘愈傷中,Csgypsy1、Csgypsy2、Cscopia3、Cs...

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
1 前言
    1.1 課題的提出
    1.2 前人研究進(jìn)展
        1.2.1 植物體細(xì)胞無(wú)性系變異概述
        1.2.2 植物中轉(zhuǎn)座子研究進(jìn)展
        1.2.3 柑橘轉(zhuǎn)座子研究進(jìn)展
    1.3 本研究的目的和意義
2 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 柑橘愈傷DNA提取
        2.2.2 RNA的提取
        2.2.3 轉(zhuǎn)座子顯示技術(shù)
        2.2.4 Southern blot
        2.2.5 反轉(zhuǎn)錄cDNA第一鏈的合成與轉(zhuǎn)座子定量PCR
        2.2.6 倍性分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 柑橘愈傷材料的體細(xì)胞胚發(fā)生及植株再生
    3.2 柑橘愈傷材料轉(zhuǎn)座子拷貝數(shù)統(tǒng)計(jì)
        3.2.1 候選轉(zhuǎn)座子的挑選
        3.2.2 伏令夏橙愈傷轉(zhuǎn)座子拷貝數(shù)統(tǒng)計(jì)
        3.2.3 轉(zhuǎn)座子southern雜交
    3.3 轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)錄活性檢測(cè)
4 討論
    4.1 柑橘愈傷中轉(zhuǎn)座子激活現(xiàn)象
    4.2 轉(zhuǎn)座子活性的影響因素
    4.3 柑橘芽變與轉(zhuǎn)座子的關(guān)系
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào)：4050892