抗壞血酸(AsA)是植物抗氧化系統(tǒng)中起非常重要作用的一種物質(zhì),而且在植物體的其它多種生理反應(yīng)中也是不可或缺的一種物質(zhì)。在人體中,抗壞血酸在維持人體機(jī)能正常運(yùn)轉(zhuǎn)過(guò)程中起到了無(wú)法替代的作用,而人類(lèi)又不具有自身合成抗壞血酸的功能,只能通過(guò)外界攝取所需的抗壞血酸。外界攝取的主要途徑是食用新鮮的瓜果蔬菜,番茄是人類(lèi)飲食中最常見(jiàn)的高抗壞血酸含量的蔬菜。因此研究如何提高番茄中抗壞血酸含量具有重要意義�，F(xiàn)在在番茄中已經(jīng)克隆到了多個(gè)抗壞血酸合成代謝主要途徑相關(guān)基因,但對(duì)于機(jī)體是如何調(diào)控抗壞血酸的代謝還有待繼續(xù)研究。本研究利用全基因組重測(cè)序數(shù)據(jù)和測(cè)序材料果實(shí)材料抗壞血酸含量關(guān)聯(lián)分析,在6號(hào)和9號(hào)染色體得到了相關(guān)性顯著的主效SNP,并在主效SNP上下50Kb的范圍內(nèi)候選了 6個(gè)基因。通過(guò)在表達(dá)水平的篩選最終篩選了兩個(gè)基因進(jìn)行了轉(zhuǎn)基因功能驗(yàn)證。本課題的主要結(jié)果如下:1.通過(guò)關(guān)聯(lián)分析在6號(hào)和9號(hào)染色體得到了幾個(gè)候選區(qū)段,并在其中候選了 6個(gè)基因,基因注冊(cè)號(hào)分別是Solyc06g009200,Solyc09g064680,Solyc09g064670,Solyc09g066290,Solyc09g065810,So...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１高等植物中抗壞血酸生物合成途徑（Ｌｉｎｓｔｅｒ?ａｎｄ?Ｃｌａｒｋｅ?２００８）??１，己糖激酶；２，磷酸葡萄糖異構(gòu)酶；３，磷酸甘露糖異構(gòu)酶（ＰＭＩ）；?４，磷酸甘露糖酶（ＰＭＭ）；?５，?ＧＤＰ－Ｄ－甘露??糖焦磷酸化酶；６，?ＧＤＰ？甘露糖－３’，５’－表型異構(gòu)酶；７，?ＧＤＰ－Ｌ－半乳糖磷酸化酶；８，?Ｌ－半乳糖－１－Ｐ磷酸酶；９，??

．圖１．１高等植物中抗壞血酸生物合成途徑（Ｌｉｎｓｔｅｒ?ａｎｄ?Ｃｌａｒｋｅ?２００８）??己糖激酶；２，磷酸葡萄糖異構(gòu)酶；３，磷酸甘露糖異構(gòu)酶（ＰＭＩ）；?４，磷酸甘露糖酶（ＰＭＭ）；?５，?ＧＤＰ－Ｄ－甘磷酸化酶；６，?ＧＤＰ？甘露糖－３’，５’－表型異構(gòu)酶；７，?ＧＤＰ－....

圖１．２植物中ＡｓＡ－ＧＳＨ循環(huán)及ＡｓＡ／ＤＨＡ穿過(guò)質(zhì)膜的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制（Ｃｏｎｋｌｉｎ?ａｎｄ?Ｂａｒｔｈ?２００４）??單脫氫抗壞血酸自由基（ＭＤＡ），單脫氫抗壞血酸還原酶（ＭＤＡＲ），抗壞血酸氧化酶（ＡＯＸ）脫氫抗壞血酸??

血酸；脫氫抗壞血酸還原酶（ＤＨＡＲ）以谷骯甘肽（ＧＳＨ）為電子供體使ＤＨＡ還原成??抗壞血酸（Ｓｍｉｒｎｏｆｆ?ａｎｄ?Ｗｈｅｅｌｅｒ?２０００）。谷胱甘肽參與抗壞血酸循環(huán)再生有效的將這??兩種抗氧化劑連接起來(lái)，形成抗壞血酸－谷胱甘肽循環(huán)途徑（圖１．２），使抗壞血酸??和谷胱甘肽....

圖３．１抗壞血酸關(guān)聯(lián)分析曼哈頓圖??Ｆ．．１ｅｎｏｍ－ｗａｓｓｏｃｉａｏｎ?ｍａｉｎｃｏｒｂａ５．５?ＭＮＰｃｒｏｓｓｏｍａｃｃｅｓｓｏｎ??

３．１關(guān)聯(lián)分析抗壞血酸相關(guān)候選基因??根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室重測(cè)序的結(jié)果和番茄紅熟果實(shí)抗壞血酸含量進(jìn)行全基因組關(guān)聯(lián)分??析，關(guān)聯(lián)分析的結(jié)果如圖３．１。根據(jù)分析結(jié)果選了?６號(hào)染色體和９號(hào)染色體兩個(gè)與??ＡｓＡ含量相關(guān)性高的區(qū)域，在主效ＳＮＰ上下游各５０Ｋｂ范圍內(nèi)候選了幾個(gè)與抗壞血??酸相關(guān)的....

圖３．３?ＡＹＡ７Ｊ２基因結(jié)構(gòu)和保守結(jié)構(gòu)域分析??Ｆｉ．３．３?Ａｎｌｉｎｉｒｒｅ?ａｎｄ?ｃｏｎｓｅｒｖｉｖｒｒｍｉｎｆ?Ｓ

ＲＲ＿ｐ１ｕｓ＿ｒｐｔ＿ｌ??圖３．４ＡＰＧ＾和保守結(jié)構(gòu)域分析??Ｆｉｇ．?３．４?Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｄｏｍａｉｎ?ｏ＼＇ＡＴＰＧＡ４?ａｎｄ?ＳＩＰＧＡ４??３．２．２轉(zhuǎn)基因表達(dá)載體的構(gòu)建??３．２．２．１?Ｓ／ＭＪ２基因干涉表達(dá)載體的構(gòu)建??根據(jù)表....

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