發(fā)布時(shí)間：2020-09-12 10:55

　　 目的本研究旨在通過(guò)對(duì)廣西與越南接壤的邊境地區(qū)和未接壤的非邊境地區(qū)2016?2017年結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的耐藥情況和基因型進(jìn)行調(diào)查和比較分析,了解兩地區(qū)間結(jié)核分枝桿菌耐藥性和基因型的差異,為加強(qiáng)結(jié)核病(Tuberculosis,TB)防控、制定針對(duì)性防控措施提供參考依據(jù)。方法選取與越南接壤的、有代表性的百色、崇左、防城港作為邊境監(jiān)測(cè)點(diǎn)(邊境組),選取未與越南接壤的有代表性的桂林、貴港作為非邊境監(jiān)測(cè)點(diǎn)(非邊境組),于2016?2017年在結(jié)核病防治機(jī)構(gòu)按照監(jiān)測(cè)病例納入標(biāo)準(zhǔn),連續(xù)納入登記治療且痰涂片抗酸桿菌陽(yáng)性的TB患者。收集患者的問(wèn)卷信息及MTB,對(duì)MTB進(jìn)行耐藥性檢測(cè),并采用溶解曲線間隔區(qū)寡核苷酸分型(Melting curve analysis-based Spoligotyping,McSpoligotyping)技術(shù)進(jìn)行基因分型,最后將數(shù)據(jù)錄入Epidata 3.0數(shù)據(jù)庫(kù)中,并用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1.廣西邊境與非邊境地區(qū)MTB耐藥情況及影響因素比較:共納入TB患者1306例,其中邊境組631例,非邊境組675例。比較邊境組和非邊境組納入患者的分布情況,結(jié)果顯示,民族、家庭人均年收入、文化水平和患者類型在兩組間的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),邊境組和非邊境組患者分別以壯族、漢族為主,邊境組家庭人均年收入≤4000元、文化水平為高中以下及復(fù)治患者所占比例均高于非邊境組。本次研究共檢測(cè)了異煙肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、鏈霉素(SM)、氧氟沙星(Ofx)、卡那霉素(Km)共6種藥物,邊境組總耐藥率、單耐藥率、多耐藥率和耐多藥率(分別為:18.07%、9.51%、2.69%和5.86%)均高于非邊境組(分別為:11.11%、7.70%、1.78%和1.63%),其中總耐藥率和耐多藥率在兩組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);邊境組對(duì)6種檢測(cè)藥物的任一耐藥率均高于非邊境組,其中INH和RFP的任一耐藥率在兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);經(jīng)單因素和多因素Logistic回歸分析,結(jié)果顯示,邊境組和非邊境組的耐藥影響因素均為患者類型,復(fù)治是兩組TB患者耐藥的危險(xiǎn)因素,其OR值在邊境組為1.86(95%CI:1.13?3.05),在非邊境組為2.72(95%CI:1.39?5.33)。2.廣西邊境地區(qū)與非邊境地區(qū)MTB基因型比較:從邊境組和非邊境組各隨機(jī)抽取450株MTB進(jìn)行McSpoligotyping試驗(yàn),共獲得881株MTB的基因分型結(jié)果,其中邊境組435株,非邊境組446株。Spoligotyping分型結(jié)果顯示,兩組菌株均可分為北京基因型和非北京基因型,其中非邊境組北京型菌株比例高于邊境組(65.25%VS 55.63%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);非北京型菌株中,邊境組可進(jìn)一步分為T族、H族、EAI族、LAM族和MANU族(所占比例分別為:22.76%、3.45%、1.84%、0.46%和0.23%),非邊境組可進(jìn)一步分為T族、H族和EAI族(所占比例分別為:19.51%、3.58%和0.22%),其中EAI族在兩組間的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);基因型聚類分析結(jié)果顯示,非邊境組MTB基因成簇率高于邊境組(80.04%VS 73.33%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);分析北京基因型與菌株耐藥的相關(guān)性,結(jié)果顯示,非邊境組北京基因型菌株總耐藥率高于非北京基因型,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),邊境組菌株耐藥率在北京基因型與非北京基因型之間的分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論廣西邊境地區(qū)經(jīng)濟(jì)、文化水平低和復(fù)治的TB患者所占比例均高于非邊境地區(qū),其耐藥結(jié)核病(Drug-resistant tuberculosis,DR-TB)尤其是耐多藥結(jié)核病(Multiple drug-resistant tuberculosis,MDR-TB)疫情較非邊境地區(qū)嚴(yán)峻,應(yīng)予以重視;復(fù)治是兩地TB患者發(fā)生耐藥的危險(xiǎn)因素;邊境地區(qū)和非邊境地區(qū)均以北京基因型MTB為主要流行菌株,但非邊境地區(qū)北京基因型比例高于邊境地區(qū);邊境地區(qū)EAI族MTB流行比例高于非邊境地區(qū);非邊境地區(qū)MTB基因成簇率高于邊境地區(qū);邊境地區(qū)MTB基因型與耐藥性之間無(wú)關(guān)聯(lián),而非邊境地區(qū)北京基因型MTB的總耐藥率高于非北京基因型。
【學(xué)位單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R52;R181.3
【部分圖文】：

圖 1-1 邊境、非邊境結(jié)核分枝桿菌耐藥類型構(gòu)成情況Figure1-1 Composition of drug resistance types of MTB in border group and non-border group2.3 耐藥影響因素分析2.3.1 單因素分析

圖 2-1 典型溶解曲線結(jié)果圖Figure2-1 Dissolution curve of typical results1.3 統(tǒng)計(jì)分析將試驗(yàn)所得的 43 位二進(jìn)制碼按 n=1、o=0 轉(zhuǎn)換成 0 和 1 的格式，同對(duì)應(yīng)的樣本編號(hào)一起錄入 Excel 表中，然后將數(shù)據(jù)表提交至國(guó)際數(shù)據(jù)庫(kù)MIRU-VNTRplus （https://www.miru-vntrplus.org/MIRU/index.faces）中，與Spol DB 4.0 數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，得到每個(gè)菌株基因所對(duì)應(yīng)的 Spoligotyping 國(guó)際型別編碼（SIT）和所屬基因家族，并進(jìn)行聚類分析，生成菌株基因型聚類球狀圖；統(tǒng)計(jì)分析軟件為 SPSS 17.0，分類變量差異的比較采用χ２檢驗(yàn)以及 Fisher 確切概率法。檢驗(yàn)均為雙側(cè)概率檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)均為α=0.05。1.4 質(zhì)量控制DNA 樣本提取中，刮取菌株時(shí)應(yīng)注意避免刮到培養(yǎng)基，吸取 DNA 上

圖 2-2 邊境組、非邊境組各基因族群分布圖Figure2-2 Distribution of various gene families in border group and non-border group2.1.2 北京基因型菌株在不同人群中的分布情況分別對(duì)邊境組和非邊境組北京基因型 MTB 在不同人群中的分布情況進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，邊境組北京基因型菌株在不同性別、年齡、現(xiàn)住址、職業(yè)和患者類型間分布無(wú)差異（P＞0.05），但在不同民族間分布有差異，經(jīng)兩兩比較發(fā)現(xiàn)漢族患者的臨床分離株中北京基因型 MTB 所占比例高于壯族（χ２=6.09，P=0.014），（詳見(jiàn)表 2-4）；非邊境組中北京基因型菌株在不同性別、現(xiàn)住址、職業(yè)和患者類型間分布無(wú)差異（P＞0.05），而在不同年齡和民族間的分布有差異，表現(xiàn)為≥60 歲患者的臨床分離株中北京基因型 MTB所占比例低于 30 59 歲患者（χ２=6.58，P=0.010）和＜30 歲患者（χ２=12.28，P=0.000）、壯族患者的臨床分離株中北京基因型 MTB 所占比例高于漢族

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