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HIV-1感染者血漿外泌體對(duì)T細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用及與CD4/CD8比值異常的關(guān)系

發(fā)布時(shí)間:2020-12-11 07:58
  背景:接受長(zhǎng)期有效cART后,HIV患者的CD4+T細(xì)胞數(shù)量可以恢復(fù)到350個(gè)/uL以上,CD4/CD8比值恢復(fù)正常。仍有部分CD4/CD8比值異常的患者,體內(nèi)CD8+T細(xì)胞顯示出更高的活化和衰老水平。本研究旨在探討在接受長(zhǎng)期有效ART治療的HIV-1感染者血漿中血漿外泌體的動(dòng)態(tài)變化、與患者CD4/CD8比值的相關(guān)性及其對(duì)T細(xì)胞功能的免疫調(diào)節(jié)作用。方法:本研究入組慢性HIV-1感染者21例,患者均為cART治療后完全應(yīng)答患者(Complete Responders,CRs)(接受cART治療2年以上,病毒載量持續(xù)2年以上低于20拷貝/mL,現(xiàn)階段CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)>350個(gè)/uL),根據(jù)患者CD4/CD8比值分為異常組和復(fù)常組,異常組(CD4/CD8<0.8)患者11例,復(fù)常組(CD4/CD8>0.8)患者10例;入組5例健康人作為對(duì)照(hea Ithy control,HC)。(1)比較三組人群中血漿外泌體的濃度變化,并分析其與CD4/CD8比值的相關(guān)性。(2)將患者的血漿外泌體與單一健康人的新鮮PBMC進(jìn)行共培養(yǎng),觀察不同組別來(lái)源外泌體對(duì)CD8+T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

HIV-1感染者血漿外泌體對(duì)T細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用及與CD4/CD8比值異常的關(guān)系


圖1血漿外泌體的鑒定??A.血漿外泌體電鏡下形態(tài);B.血漿外泌體的粒徑分布;C.血漿外泌體的WB鑒定,利用??Jurkat細(xì)胞裂解所得蛋白作為對(duì)照

患者,細(xì)胞分泌,抗體,共同培養(yǎng)


我們將CD4/CD8異;颊哐獫{與健康人PBMC在體外環(huán)境中共同培養(yǎng),加入CD3??抗體和CD28抗體進(jìn)行活化刺激孵育48小時(shí),通過(guò)檢測(cè)CD8+T細(xì)胞上的CD38和HLA-DR??的表達(dá),以明確CD4/CD8異;颊哐獫{外泌體對(duì)CD8+T細(xì)胞活化水平的影響。如圖3.?A??所示,CD4/CD8異常組患者的血漿外泌體處理的CD8+T細(xì)胞表面CD38和HLA-DR的共??表達(dá)水平明顯低于CD4/CD8復(fù);颊撸ǎ?=?0.008)和HC對(duì)照組(P?=?0.001)。相關(guān)性??分析進(jìn)一步顯示,CD8+T細(xì)胞的活化水平與患者CD4/CD8比值呈正相關(guān)(r?=?0.478,?P??=0.039),與患者CD8計(jì)數(shù)水平呈負(fù)相關(guān)(r?=?-0.479,P?=?0.038),與CD4計(jì)數(shù)水??平未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。??2.?CR患者血漿外泌體對(duì)CD8+T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響??我們觀察了患者血漿外泌體對(duì)CD8+T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子水平的影響,將患者血漿??與單一健康人PBMC在體外環(huán)境中共同培養(yǎng),加入CD3抗體和CD28抗體活化刺激孵育??48小時(shí),收獲細(xì)胞前加入GolgiStop,檢測(cè)CD8+T細(xì)胞內(nèi)的IFN-?y、TNF-?a和IL-2??水平。結(jié)果如圖4所示,CD4/CD8異常組患者的血漿外泌體處理的CD8+T細(xì)胞分泌??IFN-y的能力弱于復(fù)常組(P?=?〇.〇12)和對(duì)照組(P〈?〇.〇〇1)

患者,細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞分泌,血漿


同組患者的外泌體會(huì)對(duì)其中的CD4+T功能的影響。??1.?CR患者血漿外泌體對(duì)CD4+T細(xì)胞活化水平的影響??如圖6所示,CD4/CD8異常組患者的血漿外泌體處理的CD4+T細(xì)胞表面??CD38HLA-DR+的共表達(dá)水平明顯低于復(fù)常組(P?=?0.008)和對(duì)照組(P?=?0.001)。相關(guān)??性分析進(jìn)一步顯示,CD4+T細(xì)胞的活化與患者CD4/CD8比值呈正相關(guān)(r?=?0.?507,?P?=??0.?027),與患者CD8細(xì)胞計(jì)數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r?=?-0.?531,P?=?0.?019),與CD4細(xì)胞計(jì)數(shù)之??間未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。??2.?CR患者血漿外泌體對(duì)CD4+T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響??如圖7所示,CD4/CD8異常組患者的血漿外泌體處理的CD4+T細(xì)胞分泌IL-2的能??力弱于復(fù)常組(P?<?〇.?〇〇1)和HC對(duì)照組(P?=?0.?003),著提示CD4+T細(xì)胞分泌IL-2的??水平也會(huì)受到CD4/CD8異;颊叩难獫{外泌體的抑制性調(diào)節(jié),且IL-2的分泌水平與??患者CD4/CD8比值之間有顯著相關(guān)性(r?=?0.778,P〈?0.001),與患者CD8細(xì)胞計(jì)數(shù)??間也存在顯著相關(guān)性(r?=?-0.738,?P〈?0.001),與CD4細(xì)胞計(jì)數(shù)之間未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。??另外


本文編號(hào):2910167

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