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凝集素DSA識別的乙肝相關肝硬化患者唾液中特異性糖鏈結構的研究

發(fā)布時間:2024-07-10 19:08
  研究背景:慢性乙肝是由乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)引起的,以肝臟炎性病變?yōu)橹鞯囊活惓R娂膊。我國是慢性肝炎特別是乙型肝炎(HBV-induced chronic hepatitis,HB)的高流行區(qū),約2%10%的患者可轉化為肝硬化(Hepatic Cirrhosis,HC)。目前,HC的各種檢測方法分別受其技術特點的限制,分別存在特異性低、取樣不便和不能早期診斷等缺陷。本實驗室在前期研究中采用凝集素芯片檢測技術,分析了491例HBV誘發(fā)的肝炎、肝硬化和肝癌患者和156例健康志愿者(Healthy Volunteer,HV)的唾液樣本,有14個凝集素(例如MAL-II,UEA-I和DSA)顯示了它們識別的唾液糖蛋白糖型在肝病發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)生了顯著變化,制備出了一款針對HBV誘發(fā)的肝病檢測的小型凝集素芯片,并構建了數學診斷模型。本研究首先運用這款凝集素芯片進行盲測,驗證數學診斷模型的準確性,并采用唾液芯片和DSA凝集素印跡技術驗證肝病患者唾液中的糖蛋白糖鏈結構的差異,最后利用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜技術(MALDI-TOF/T...

【文章頁數】:71 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.乙型肝炎病毒Dane顆粒結構示意圖

圖1.乙型肝炎病毒Dane顆粒結構示意圖

西北大學碩士學位論文肝炎病毒[10]。HBV也可在孕婦分娩期間從表現(xiàn)出的癥狀主要包括皮膚,眼睛和尿液出[11]。型的DNA病毒,具有逆轉錄酶活性,屬于因型,且地理分布差異較大。HBV病毒有四心抗原HBcAg組成的核衣殼和核心蛋白、蛋白和具有轉錄反式激活潛力的聚合酶等。....


圖2.肝病發(fā)展簡易流程圖

圖2.肝病發(fā)展簡易流程圖

西北大學碩士學位論文Cell)可以誘導MHCI型基因下調的細胞和應激誘導的配體過表達細胞的凋亡。由于細胞外基質結構發(fā)生改變而導致的肝細胞纖維化,使得自然殺傷細胞與腫瘤和星狀細胞靶標分離,細胞功能降低,腫瘤監(jiān)測功能失常[22]。雖然幾乎沒有由于家族遺傳而患病的肝癌患者,但已經....


圖3.凝集素芯片點樣陣列

圖3.凝集素芯片點樣陣列

完成后用離心機,500rpm,25℃離心10min,離心干燥,最后放入常溫干燥箱中保存。芯片的點制凝集素點樣液依次加入384孔板中,設計好凝集素芯片yer48點樣儀進行凝集素芯片的點制。針對HBV誘發(fā)的點樣陣列如圖3所示,陣列中包括內參探針PTL-Ⅱ,1EA-....


圖4.肝病患者唾液芯片設計示意圖

圖4.肝病患者唾液芯片設計示意圖

本的準備唾液采集前用生理鹽水漱口三次,以確?谇恍l(wèi)生;采集時舌分泌的唾液樣本至少1mL至離心管,并于冰上暫時保存;離心機棄去沉淀,留取清液并測定蛋白濃度,加入1μL蛋白酶抑制劑性,以保持唾液樣本中蛋白的活性,處理完成后于-80℃冰箱片的設計HB,HC和HCC四組樣本....



本文編號:4004592

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