發(fā)布時間：2025-04-11 01:28

　　金黃色葡萄球菌是引發(fā)奶牛乳腺炎的主要病原菌之一,它是一種非典型的胞內(nèi)寄生菌,可以引起細胞炎癥并通過釋放多種毒素加重細胞感染,尤其是其釋放的α-溶血素,在金黃色葡萄球菌入侵奶牛乳腺組織的過程中通過破壞細胞膜結(jié)構(gòu)從而導(dǎo)致細胞大量死亡。許多研究發(fā)現(xiàn),通過中和作用或抑制毒力因子的分泌就能達到緩解炎癥發(fā)生,許多中藥已經(jīng)被證明具有很好的中和細菌毒素、抑制細菌毒力蛋白分泌和消除炎癥的作用。本課題通過研究苦參堿對產(chǎn)α-溶血素金黃色葡萄球菌損傷奶牛乳腺上皮細胞的干預(yù)作用,從而為研究中藥干預(yù)病原菌損傷宿主細胞的機制奠定基礎(chǔ)。首先用二倍稀釋法和紫外分光光度計法測定苦參堿對金黃色葡萄球菌的藥物敏感性及其對細菌生長的影響;用家兔紅細胞溶血實驗檢測苦參堿對金黃色葡萄球菌α-溶血素活性的影響、實時熒光定量PCR法及Western Bloting檢測苦參堿對金黃色葡萄球菌分泌α-溶血素的影響;用CCK-8法和流式細胞儀檢測苦參堿對奶牛乳腺上皮細胞的增殖和金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)其凋亡的影響;本課題重點研究苦參堿對金黃色葡萄球菌入侵奶牛乳腺上皮細胞的影響并確認其發(fā)揮調(diào)控作用的通路。發(fā)現(xiàn)苦參堿對金黃色葡萄球菌的MIC在1.25 ...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1一金負色翻萄球翻入俊細腦栩型}81}

Ｆｉｇ?１－４?Ｃｕｒｒｅｎｔ?ｍｏｄｅｌｏｆｔｈｅ?Ｓ．?ａｕｒｅｕｓ?ｉｎｖａｓｉｏｎ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ１８５１??的多樣性以及不同分離株的潛在關(guān)鍵分子在體內(nèi)差異表達１８６１都應(yīng)該作球菌疫苗考慮之列。一個理想的免疫治療藥劑應(yīng)該能夠防止細菌粘附，消除并中和有毒的外蛋白。因此，....

圖２－２苦參堿對金黃色葡萄球菌ＵＳＡ３００生長的影響??Ｆｉｇ?２－２?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｍａｔｒｉｎｅ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ?Ｓ．?ａｕｒｅｕｓ?ＵＳＡ３００．??

２．３．２苦參堿影響金黃色葡萄球菌生長曲線的測定結(jié)果??使用紫外分光光度計檢測不同濃度苦參堿與金黃色葡萄球菌共培養(yǎng)的ＯＤ６００?ｎｍ，繪制金黃??色葡萄球菌生長曲線，如圖２－２所示，發(fā)現(xiàn)２５６?ｐｇ／ｍＬ濃度以內(nèi)的苦參堿并不會影響金黃色葡萄??球菌的生長。??３?：??Ｅ?中０—....

圖２－４苦參堿對金黃色葡萄球菌分泌ａ－溶血素的影響??

２．３．５苦參堿對金黃色葡萄球菌ａｇｒ／Ｋ?／７／〇基因相對表達量的影響??Ｗｃｚ基因編碼ａ－溶血素的表達，ａｇｒ基因編碼的二元調(diào)控系統(tǒng)在其上游正向調(diào)控ａ－溶血素的??表達，因此通過ＲＴ－ＰＣＲ分析基因Ｗａ和ａｇｒＪ的相對表達量。由圖２－３可知，不同濃度的苦參堿作??用于金黃色葡....

圖３－ｌ苦參堿對ｂＭＥＣｓ增殖的影響??Ｆｉｇ?３－１?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｍａｔｒｉｎｅ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｂＭＥＣｓ．??

３．３結(jié)果??３．３．１苦參堿對ｂＭＥＣｓ增殖的影響作用??本試驗用ＣＣＫ－８法測定苦參堿對ｂＭＥＣｓ增殖的作用，由圖３－１可知，１００?ｆｉｇ／ｍＬ內(nèi)的苦參??堿對ｂＭＥＣｓ均無細胞毒性，且對細胞增殖具有一定的提高作用，其中７５?ｎｇ／ｍＬ的苦參堿對細胞??活力的促進作用最大。....

本文編號：4039294