研究乙型腦炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)感染后小鼠原代神經(jīng)元細(xì)胞miRNA的表達(dá)譜差異,初步探討JEV與宿主在miRNA水平的相互作用。分別提取JEV感染48 h后的小鼠原代神經(jīng)元細(xì)胞和未染毒組細(xì)胞,高通量測序分析miRNA的表達(dá)譜并進(jìn)行差異分析,選取顯著差異表達(dá)的miRNA進(jìn)行實(shí)時定量PCR驗(yàn)證。結(jié)果篩選出26個差異表達(dá)顯著的miRNA,其中,18個表達(dá)上調(diào),8個表達(dá)下調(diào)。小鼠原代腦神經(jīng)元細(xì)胞中mmu-miR-21a-3p、mmu-miR-223-5p、mmu-miR-147-3p、mmu-miR-155-5p和mmu-miR-146a-5p的表達(dá)促進(jìn)JEV-E基因在神經(jīng)元細(xì)胞中表達(dá),而mmu-miR-301a的表達(dá)抑制JEV-E基因的表達(dá)。神經(jīng)元細(xì)胞中miRNA的表達(dá)影響JEV的復(fù)制,為進(jìn)一步研究JEV致神經(jīng)功能異常機(jī)制提供研究方向和理論支持。

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圖1 實(shí)時定量PCR驗(yàn)證選取的26個miRNA的差異表達(dá)情況

JEV的感染引起宿主細(xì)胞內(nèi)環(huán)境變化,利于JEV復(fù)制增殖。miRNAs參與細(xì)胞進(jìn)程及宿主免疫和病毒感染等[5]。Sharma等[6]發(fā)現(xiàn)JEV感染導(dǎo)致mmu-miR-146a-5p表達(dá)上調(diào),抑制NF-κB活性并阻斷抗病毒通路。Deng等[7]證實(shí)JEV感染促進(jìn)C8-B4細(xì)胞中miR....

圖2 實(shí)時定量PCR檢測原代神經(jīng)元細(xì)胞中JEV-E基因

圖1實(shí)時定量PCR驗(yàn)證選取的26個miRNA的差異表達(dá)情況4結(jié)論

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