干細胞因子(SCF)是一種生長因子,在黑素細胞遷移、細胞增殖和分化中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。為了探討SCF的分子特性及其在不同毛色羊駝皮膚中的表達模式,本研究通過PCR克隆羊駝Scf基因的全長編碼區(qū)(CDS),并運用生物信息學(xué)預(yù)測其編碼蛋白質(zhì)特征;采用實時定量PCR (qRT-PCR)、Western印跡和免疫熒光分析SCF的表達模式和組織分布。結(jié)果表明,Scf編碼區(qū)核苷酸為740 bp,編碼1個246個氨基酸的前體蛋白質(zhì)。該蛋白質(zhì)包含1個跨膜區(qū)和1個信號肽,其二級結(jié)構(gòu)核心是4個α-螺旋(αA,αB,αC和αD)和2條反平行的β-折疊鏈;序列比對和系統(tǒng)發(fā)育分析顯示,羊駝SCF序列與豬、牛、羊同屬于一個分支;棕色羊駝皮膚SCF表達顯著高于白色羊駝,SCF蛋白主要位于毛囊基質(zhì)與毛根鞘中,且Fontana-Masson染色顯示,棕色羊駝皮膚中含有更多的黑色素顆粒。以上研究結(jié)果證實,在棕色羊駝毛皮膚中SCF的表達量和黑色素含量均高于白色羊駝毛皮膚,且SCF的高級結(jié)構(gòu)與毛色形成密切相關(guān)。

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 Materials and Methods
    1.1 Sample collection and total RNA extraction
    1.2 Cloning of SCF cDNA
    1.3 Sequence and protein analysis
    1.4 Quantitative real-time PCR
    1.5 Western blot analysis
    1.6 Immunofluorescence
    1.7 Fontana-Masson staining
    1.8 Statistical analysis
2 Results
    2.1 Cloning and sequence analysis of alpaca SCF CDS
    2.2 The expression of Scf at the mRNA level in brown alpaca skin was higher
    2.3 The protein expression of SCF in brown alpaca skin was higher
    2.4 SCF staining in brown alpaca skin was strongly positive
    2.5 Fontana-Masson stain in alpaca skin
3 Discussion



本文編號：4055708