研究背景:腎小球疾病是以腎小球變態(tài)反應(yīng)性炎癥為主要特點(diǎn)的泌尿系統(tǒng)疾病,其中足細(xì)胞損傷是腎小球腎炎起始階段的重要事件,足細(xì)胞形態(tài)、功能異常以及大量凋亡會(huì)嚴(yán)重破壞腎小球的過(guò)濾屏障功能,引起以大量蛋白尿、低蛋白血癥和高脂血癥為主要臨床表現(xiàn)的腎病綜合征。因此探討腎小球足細(xì)胞損傷的發(fā)生發(fā)展機(jī)制并尋找有效的治療靶點(diǎn),具有較高的臨床意義和科研價(jià)值。Plectin蛋白是一種在腎小球足細(xì)胞中廣泛表達(dá)的細(xì)胞骨架蛋白,具有啞鈴狀結(jié)構(gòu),包含一個(gè)中央的200 nm長(zhǎng)的桿狀結(jié)構(gòu)域和兩側(cè)的球狀結(jié)構(gòu)域,這種多域結(jié)構(gòu)使plectin蛋白能夠與大量不同的蛋白質(zhì)相互作用并顯著影響其功能。由于plectin蛋白在維持細(xì)胞正常形態(tài)、骨架穩(wěn)定以及結(jié)構(gòu)完整方面發(fā)揮重要作用,其表達(dá)異常可能會(huì)直接影響到足細(xì)胞形態(tài)和功能,進(jìn)而影響腎小球的濾過(guò)功能。除了起到連接作用外,plectin蛋白在涉及肌動(dòng)蛋白(actin)細(xì)胞骨架動(dòng)態(tài)調(diào)整的生理過(guò)程中也起到關(guān)鍵作用。此外,plectin蛋白還可作為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的支架平臺(tái),如整合素α6β4(integrin α6β4)和粘著斑激酶(focal adhesion kinase,FAK),這已經(jīng)成為研究人...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

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圖２．?ＡＤＲ通過(guò)線粒體氧化應(yīng)激抑制ｐｌｅｃｔｉｎ表達(dá)

過(guò)線粒體氧化應(yīng)激抑制ｐｌｅｃｔｉｎ表達(dá)。（ａ－ｂ?）流式細(xì)胞術(shù)按照設(shè)定時(shí)間點(diǎn)作用于足細(xì)胞上引起的ＲＯＳ產(chǎn)生量變的ＲＯＳ生成量與ＮＣ組相比ｐ＜０．０１。（ｃ－ｅ）?０．５?Ｕ?ｇ／ｍｌ?Ａ于足細(xì)胞上引起的ｐｌｅｃｔｉｎ表達(dá)量變化情況。４為與ＮＣ組相比ｐ＜０．０１，?Ｎ．Ｓ．為與ＮＣ....

圖４．?ｓｉＰｌｅｃｔｉｎ對(duì)ｉｎｔｅｇｒｉｎａ?６ｐ４磷酸化以及ＦＡＫ和ｐ３８活化的時(shí)間過(guò)程效應(yīng)

圖４．?ｓｉＰｌｅｃｔｉｎ對(duì)ｉｎｔｅｇｒｉｎａ?６ｐ４磷酸化以及ＦＡＫ和ｐ３８活化的時(shí)間過(guò)程效ｓｉＰｌｅｃｔｉｎ轉(zhuǎn)染后蛋白表達(dá)水平的Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析。該實(shí)驗(yàn)顯示ｓｉＲＮＡ＃３是最有效的ｓｉＲＮＡ；因此，該ｓｉＲＮＡ在隨后的實(shí)驗(yàn)中使用。（ｃ）流式細(xì)胞結(jié)果顯示，ｓｉＰｌｅ....

圖７．ｐ３８通過(guò)激活Ｂａｘ和ｃａｓｐａｓｅ－３誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡

圖７．ｐ３８通過(guò)激活Ｂａｘ和ｃａｓｐａｓｅ－３誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡。對(duì)于ＡＤＲ組，足細(xì)胞用??０．５ｌＩｇ／ｍｌＡＤＲ處理１２小時(shí)。對(duì)于ＡＤＲ?＋?ｐｌｅｃｔｉｎ組或ＡＤＲ?＋?ＭＯＣＫ組，將足??細(xì)胞與ｐＥＧＦＰ－Ｎｌ－ｐｌｅｃｔｉｎ質(zhì)�；蚩蛰d體一起溫育６小時(shí)，然后正常培養(yǎng)４２小時(shí)，....

圖９．抑制ｐｌｅｃｔｉｎ蛋白表達(dá)誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡和Ｆ－ａｃｔｉｎ細(xì)胞骨架破壞的機(jī)制示意圖

通過(guò)抑制ｐｌｅｃｔｉｎ表達(dá)和激活ｉｎｔｅｇｒｉｎ?ａ?６（３４／?ＦＡＫ?／ｐ３８?ＭＡＰＫ腎功能不全的發(fā)生。通過(guò)尾靜脈將ＡＤＲ按照７．５ｍｇ?／?ｋｇ單誘導(dǎo)的腎病模型。ＡＤＲ注射后第４周結(jié)束時(shí)對(duì)所有大鼠實(shí)施檢查顯示ＡＤＲ治療后腎小球萎縮和消失以及腎小管腫脹。（ｂ鏡檢查顯示存在正....

本文編號(hào)：4054004