針對(duì)膠原基生物材料,通過不同方法研究了基于牛膠原的海綿和脫細(xì)胞基質(zhì)材料的降解過程,比較兩種材料的降解規(guī)律,定量考察了膠原基材料體內(nèi)降解周期。通過在SD大鼠脊柱兩側(cè)皮下分別植入膠原海綿與脫細(xì)胞基質(zhì),在不同周數(shù)取樣,分別觀察兩種材料降解程度并稱重建立降解曲線,利用高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)篩選出牛I型膠原的特征多肽GEGGPQGPRG,并進(jìn)行定量分析。分批次將大鼠體內(nèi)殘留部分進(jìn)行酶解,再利用三重四極桿質(zhì)譜對(duì)特征肽進(jìn)行定量,建立降解曲線。結(jié)果表明,脫細(xì)胞基質(zhì)與膠原海綿體內(nèi)降解趨勢(shì)相似。膠原海綿降解8周特征肽濃度為（0.40±0.10）×10^-5mg/mL,表明膠原海綿降解較為完全。脫細(xì)胞基質(zhì)降解16周特征肽濃度為（1.30±0.11）×10^-5mg/mL,表明脫細(xì)胞基質(zhì)降解較為完全。

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圖1 膠原海綿與脫細(xì)胞基質(zhì)材料大鼠體內(nèi)降解過程

兩種材料不同時(shí)間點(diǎn)取樣,樣品冷凍干燥稱重。膠原海綿0周(8.6±0.2)mg,1周(7.3±0.4)mg,2周(6.2±0.4)mg,4周(2.1±0.9)mg,6周(0±1.2)mg。脫細(xì)胞基質(zhì)0周(14.5±0.1)mg,2周(12.7±0.3)mg,4周(8.....

圖2 失重法體內(nèi)降解曲線

圖1膠原海綿與脫細(xì)胞基質(zhì)材料大鼠體內(nèi)降解過程2.3特征肽篩選實(shí)驗(yàn)

圖3 特征多肽GEGGPQGPR提取離子流圖和一級(jí)質(zhì)譜圖

P1、P2發(fā)生羥基化修飾過多不利于定量。對(duì)P3進(jìn)行HPLC-MS分析,m/z854.42是單電荷離子,m/z427.71是雙電荷離子,與帶單電荷離子相比,離子m/z427.71的二級(jí)質(zhì)譜圖中的碎片離子信號(hào)強(qiáng)度較高,更易被檢測(cè)出。P3肽段GEGGPQGPR肽鏈短小,分....

圖4 特征多肽GEGGPQGPR二級(jí)質(zhì)譜圖

圖3特征多肽GEGGPQGPR提取離子流圖和一級(jí)質(zhì)譜圖2.4特征肽濃度與信號(hào)強(qiáng)度關(guān)系

本文編號(hào)：4056057