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高鹽刺激可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化從而促進(jìn)腎臟成纖維細(xì)胞的增殖及表型轉(zhuǎn)化

發(fā)布時(shí)間:2025-06-27 23:36
   目的探討高鹽誘導(dǎo)單核巨噬細(xì)胞極化,以及極化后巨噬細(xì)胞對(duì)腎臟纖維細(xì)胞株(NRK-49F)增殖及表型轉(zhuǎn)化的影響。方法培養(yǎng)大鼠骨髓單核巨噬細(xì)胞及NRK-49F,隨后予以高鹽(Na+161 mmol/L)刺激單核巨噬細(xì)胞2 h。采用RT-qPCR檢測(cè)M0、M1、M2各型巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物,同時(shí)分別收集正常及高鹽組巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基,予以RT-qPCR及Elisa分別檢測(cè)培養(yǎng)基中IL-6及TGF-β的mRNA表達(dá)與蛋白表達(dá)。隨后建立巨噬細(xì)胞與NRK-49F的Transwell小室共培養(yǎng)體系。采用EdU及Transwell分別檢測(cè)NRK-49F增殖及遷移能力。予以Western blot檢測(cè)NRK-49F中collagen I、collagen III及α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)相對(duì)表達(dá)情況。結(jié)果 RT-qPCR結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,高鹽組細(xì)胞中表達(dá)M2型巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物甘露糖受體(MR)和精氨酸酶(Arg)基因的mRNA水平顯著升高(P<0.05)。EdU及Transwell結(jié)果顯示,共培養(yǎng)體系中,高鹽處理巨噬細(xì)胞組上層NRK-49F增殖、遷移能力增強(qiáng)(P<0.05)。West...

【文章頁數(shù)】:8 頁

【部分圖文】:

圖1 免疫熒光鑒定M0巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物F4/F80

圖1 免疫熒光鑒定M0巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物F4/F80

巨噬細(xì)胞經(jīng)原代分離培養(yǎng)后為M0型巨噬細(xì)胞,以F4/80作為表面標(biāo)記行免疫熒光染色,如(圖1)所示,95%以上的細(xì)胞均表達(dá)F4/80,為綠色熒光,進(jìn)一步證實(shí)培養(yǎng)單核巨噬細(xì)胞成功;M1型巨噬細(xì)胞由于其具有促進(jìn)炎的作用,因此高表達(dá)炎癥相關(guān)基因IL-1β、TNF-α;M2型巨噬細(xì)胞具有強(qiáng)....


圖2.巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物MR基因m RNA相對(duì)水平

圖2.巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物MR基因m RNA相對(duì)水平

RT-qPCR結(jié)果顯示(圖10),高鹽組細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-6與TGF-βmRNA均顯著高于正常組表達(dá)(P<0.05)。Elisa結(jié)果顯示(表2),與正常組相比,高鹽組細(xì)胞培養(yǎng)液中IL-6與TGF-β1分泌量顯著增高(P<0.05)。圖3巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物Arg基因mRNA....


圖3 巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物Arg基因m RNA相對(duì)水平

圖3 巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物Arg基因m RNA相對(duì)水平

圖2.巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物MR基因mRNA相對(duì)水平3討論


圖4 巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物IL-1β基因m RNA相對(duì)水平

圖4 巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記物IL-1β基因m RNA相對(duì)水平

高血壓所致的腎臟損傷引起腎臟纖維化的機(jī)制十分復(fù)雜,包括免疫炎癥反應(yīng),氧化應(yīng)激、神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)等[14-15]。其中,在免疫炎癥反應(yīng)中,巨噬細(xì)胞浸潤、極化并分泌多種炎癥介質(zhì)及細(xì)胞因子是導(dǎo)致腎臟纖維化的重要原因[16-17]。研究表明,在患病人群及動(dòng)物模型的腎小球及腎小管間質(zhì)中均可見....



本文編號(hào):4054067

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