目的觀察線粒體鈣單向轉(zhuǎn)運(yùn)體(mitochondrial Ca²⁺ uniporter,MCU)在模擬失重引起大鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞凋亡中的作用。方法采用尾吊大鼠方法建立模擬失重模型,實(shí)驗(yàn)大鼠分為對(duì)照（Control,CON）組和尾吊（tail suspension,SUS）組。造模成功后,分離腦動(dòng)脈血管,取病理切片行TUNEL染色及細(xì)胞色素C免疫熒光染色檢測(cè)平滑肌細(xì)胞凋亡水平,蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白及MCU蛋白表達(dá)水平,最后急性分離腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,分別采用Rhod-2 AM、mitoSOX染色檢測(cè)細(xì)胞線粒體內(nèi)Ca²⁺水平和活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平。結(jié)果與對(duì)照組比較,尾吊組模擬失重大鼠基底動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞TUNEL陽(yáng)性率顯著增加（P<0.05）,細(xì)胞色素C入核率顯著增加（P<0.05）,促凋亡蛋白cleaved caspas-9、cleaved caspas-3、Bax表達(dá)顯著增加（P<0.05）,抑制凋亡蛋白Bcl-2顯著降低（P<0.05）;同時(shí),MCU蛋白表達(dá)水...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 模擬失重大鼠模型的建立
        1.2.2 TUNEL染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        1.2.3 Western blot法檢測(cè)蛋白表達(dá)
        1.2.4 急性分離大鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
        1.2.5 免疫熒光檢測(cè)腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞MCU與細(xì)胞色素C
        1.2.6 腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞線粒體ROS與Ca2+濃度檢測(cè)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物建模
    2.2 模擬失重對(duì)大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞凋亡的影響
    2.3 模擬失重大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞MCU表達(dá)的檢測(cè)
    2.4 模擬失重大鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞線粒體Ca2+濃度的檢測(cè)
    2.5 模擬失重大鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞ROS水平的檢測(cè)
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