目的:從細(xì)胞水平上研究草蓯蓉多糖(BRPS)對叔丁基過氧化氫(TBHP)引起的HepG2細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用及其分子機(jī)制。方法:采用TBHP誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞得到凋亡模型。采用四甲基偶氮唑鹽比色(MTT)法檢測BRPS對HepG2細(xì)胞的毒性作用,MTT法檢測BRPS對TBHP損傷HepG2細(xì)胞存活率的影響;通過Hoechst 33342熒光染色法觀察TBHP誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞的凋亡情況;通過JC-1熒光染色法觀察TBHP引起HepG2細(xì)胞內(nèi)的線粒體跨膜電位的變化;Western blot檢測細(xì)胞Bax、Bcl-2、Cleaved caspase 3、Procaspase8、Cleavedcaspase9、JNK、p-JNK、ERK、p-ERK、p38 和 p-p38 蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:經(jīng)過不同濃度的BRPS保護(hù)24h之后,與TBHP組相比,BRPS可以有效提高細(xì)胞存活率(P<0.05)。Hoechst33342染色結(jié)果顯示,與正常組相比,TBHP組細(xì)胞凋亡增加;與TBHP組相比,NAC組細(xì)胞凋亡稍微減輕;與TBHP組相比,BRPS組隨著用藥濃度的增加,細(xì)胞凋亡程度逐漸減輕。JC-...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．時間一定時不同濃度ＴＢＨＰ對ＨｅｐＧ２細(xì)胞的影響??

３．１?ＴＢＨＰ對ＨｅｐＧ２細(xì)胞的影響??３．１．１不同濃度的ＴＢＨＰ對ＨｅｐＧ２細(xì)胞的影卩向??圖１所示。當(dāng)作用時間一定時，隨著ＴＢＨＰ濃度的升高，ＨｅｐＧ２細(xì)胞存活??率逐漸降低，而且呈現(xiàn)濃度依賴性趨勢。當(dāng)ＴＢＨＰ的濃度分別為５０、１００、２００、??４００、８０〇ｎｍｏｌ／....

圖４．?ＢＲＰＳ對ＨｅｐＧ２細(xì)胞ｃａｓｐａｓｅ家族蛋白表達(dá)影響??１９??

??延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文??３．４?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?檢測結(jié)果??圖?４?所示。與正常組相比，ＴＢＨＰ?組?Ｃｌｅａｖｅｄｃａｓｐａｓｅ?３?（Ｃ－ｃａｓｐ?３）和?Ｃｌｅａｖｅｄ??ｃａｓｐａｓｅ９?（Ｃ－ｃａｓｐ９）蛋白表達(dá)量顯著升高（Ｐ＜０．０１），而Ｐｒｏｃａｓｐ....

圖５．?ＢＲＰＳ對ＨｅｐＧ２細(xì)胞Ｂｃｌ－２家族蛋白表達(dá)影響??

延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文??圖５所示。與正常組相比，ＴＢＨＰ組Ｂａｘ蛋白表達(dá)量顯著升高（Ｐ＜０．０１），??Ｂｃｌ－２蛋白表達(dá)量顯著降低（Ｐ＜０．０１），Ｂａｘ／Ｂｃｌ－２的比值顯著升高（Ｐ＜０．０１）。與??ＴＢＨＰ組相比，ＮＡＣ組Ｂａｘ蛋白表達(dá)量顯著降低（ＰＯ．Ｏｌ），Ｂｃｌ－２....

圖７．?ＢＲＰＳ對ＨｅｐＧ２細(xì)胞ＥＲＫ和ｐ－ＥＲＫ蛋白表達(dá)影響??

延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文??圖７所示。在每組細(xì)胞中都有ＥＲＫ蛋白和ｐ－ＥＲＫ蛋白的表達(dá)，與正常組相??比，ＴＢＨＰ組細(xì)胞中ｐ－ＥＲＫ蛋白表達(dá)量顯著升高（／＞＜０．０１）。與ＴＢＨＰ組相比，??ＢＲＰＳ組細(xì)胞中ｐ－ＥＲＫ蛋白表達(dá)量有所降低（尸＜０．０５）。??正常?ＴＢＨＰ?ＢＲＰＳ?....

本文編號：4052202