目的:觀察基于“主客交”理論的加減三甲散治療肝纖維化的療效以及對Th17/Treg平衡的調(diào)控,從免疫學(xué)的角度揭示其作用機制,探索“主客交”理論的實證依據(jù),豐富“主客交”病機理論的科學(xué)內(nèi)涵。方法:1.采取豬血清腹腔注射建立大鼠免疫性肝纖維化模型,以加減三甲散干預(yù),并以復(fù)方鱉甲軟肝片做對照藥物,治療60天后檢測大鼠肝功能、肝纖維化及血液流變學(xué)指標(biāo),通過HE染色及Masson染色觀察病理形態(tài),了解大鼠肝纖維化程度。2.以RT-PCR法檢測Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子RORγt和Treg細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3基因表達(dá)水平,比較RORγt/Foxp3比值的變化;ELISA法檢測肝組織中Th17細(xì)胞的相關(guān)因子IL-6,IL-17,IL-21、IL-23及Treg細(xì)胞相關(guān)因子IL-10,TGF-β1的表達(dá),比較Th17和Treg細(xì)胞因子比值的變化。結(jié)果:1.病理學(xué)觀察正常組無纖維化改變,模型組中央靜脈及匯管區(qū)顯著纖維組織增生,加減三甲散組及鱉甲軟肝片組纖維化程度低于模型組;模型組的肝組織膠原纖維面積較正常組顯著增大(P<0.01),加減三甲散組較模型組顯著減小(P<0.01)),較正常...

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮略詞對照表
前言
第一部分 理論研究
    一、現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對肝纖維化的認(rèn)識概況
        1.肝纖維化的概念及研究的意義
        2.肝纖維化發(fā)生的病因
            2.1 病毒
            2.2 酒精
            2.3 代謝異常
            2.4 藥物或化學(xué)毒物
            2.5 自身免疫性肝病
            2.6 其他
        3.肝纖維化的發(fā)病機制
            3.1 星狀細(xì)胞(HSC)活化是肝纖維的中心環(huán)節(jié)
            3.2 肝細(xì)胞(Hepatocyte HC)損傷是誘發(fā)肝纖維化的根本原因
            3.3 枯否細(xì)胞(KC)對HSC的旁分泌激活作用是肝纖維化形成的中心通路
            3.4 TGF-β/Smad是HSC活化的主要信號通路
            3.5 MMPs/TIMPs失衡引起ECM異常沉積形成肝纖維化
        4.肝纖維化的診斷
            4.1 臨床評估
            4.2 肝組織病理學(xué)檢查
            4.3 血清學(xué)診斷
                4.3.1 直接指標(biāo)
                4.3.2 間接指標(biāo)
                4.3.3 血清生化標(biāo)志物數(shù)學(xué)診斷模式
            4.4 影像學(xué)診斷
        5.肝纖維化的西醫(yī)治療
            5.1 病因治療
            5.2 抗炎/保護肝細(xì)胞
            5.3 針對HSCs的治療
            5.4 調(diào)節(jié)ECM
            5.5 其他
    二、Th17/Treg平衡與肝纖維化
        1.關(guān)于Th17細(xì)胞
            1.1 Th17細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)及生物學(xué)效應(yīng)
            1.2 Th17細(xì)胞的分化及關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子
            1.3 Th17細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子
        2.關(guān)于Treg細(xì)胞
            2.1 Treg細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)及生物學(xué)效應(yīng)
            2.2 Treg細(xì)胞的分化及關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子
            2.3 Treg細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子
        3.關(guān)于Th17/Treg平衡及調(diào)控
            3.1 Th17/Treg平衡的意義
            3.2 Th17/Treg平衡的調(diào)控
        4.Th17/Treg與肝纖維化
            4.1 Th17/Treg與乙型病毒性肝炎相關(guān)性肝纖維化
            4.2 Th17/Treg與丙型病毒性肝炎相關(guān)性肝纖維化
            4.3 Th17/Treg與自身免疫性肝病相關(guān)性肝纖維化
            4.4 Th17/Treg與酒精性肝纖維化
            4.5 Th17/Treg與肝纖維化動物模型
    三、傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)對肝纖維化的認(rèn)識概況
        1.肝纖維化的病名
        2.肝纖維化的病因病機
            2.1 正氣不足為發(fā)病基礎(chǔ)
            2.2 濕熱疫毒為病理因素
            2.3 “瘀血內(nèi)阻”為病理特征
            2.4 正虛邪戀為最終轉(zhuǎn)歸
        3.肝纖維化的辨證及治療
            3.1 初期重在清熱解毒祛濕
            3.2 后期注重養(yǎng)肝健脾益腎
            3.3 活血化瘀貫穿始末
    四、“主客交”與肝纖維化
        1.“主客交”原文研讀
            1.1 病因
            1.2 失治誤治情況
            1.3 “主客交”病機的提出
            1.4 “主客交”的病機特點
            1.5 “主客交”的病理特征-脈絡(luò)凝瘀
            1.6 主客交的治療
        2.主客交的理論淵源
        3.主客交的繼承及發(fā)揮
        4.“主客交”與肝纖維化
            4.1 “主客交”與肝纖維化的病因一致
            4.2 “主客交”與肝纖維化的病機特點相似
            4.3 “主客交”與肝纖維化的病理特征相似
            4.4 基于“主客交”理論的加減三甲散治療肝纖維化療效確切
    五、研究課題的提出
第二部分 實驗研究
    實驗一：免疫性肝纖維化大鼠模型的建立及加減三甲散的干預(yù)作用
        1.試驗材料
            1.1 動物
            1.2 藥品
            1.3 試劑
            1.4 儀器
        2.試驗方法
            2.1 實驗動物分組
            2.2 免疫性肝纖維化大鼠模型制備
            2.3 給藥方法
            2.4 取材
        3.檢測指標(biāo)及方法
            3.1 一般狀況觀察
            3.2 肝組織病理學(xué)觀察
            3.3 肝功能相關(guān)指標(biāo)檢測
            3.4 肝纖維化指標(biāo)檢測
            3.5 血液流變學(xué)指標(biāo)檢測
        4.統(tǒng)計方法
        5.試驗結(jié)果
            5.1 動物一般表現(xiàn)
            5.2 肝組織病理改變
            5.3 肝功能AST、ALT、ALB、TP
            5.4 肝纖維化指標(biāo)
            5.5 血液流變學(xué)結(jié)果
    實驗二：加減三甲散對肝纖維化大鼠Th17/Treg平衡的調(diào)控
        1.試驗材料
        2.試驗方法
            2.1 RT-PCR法檢測RORγt及Foxp3基因表達(dá)水平
            2.2ELISA法檢測TGF-β、IL-10和IL-6,IL-17、IL-21、IL-23
        3.統(tǒng)計方法
        4.試驗結(jié)果
            4.1 各組大鼠RORγt、FOXP3、RORγt/FOXP3比較
            4.2 各組大鼠IL-6、IL-17、TGF-β、IL-6/TGF-β、IL-17/TGF-β比較
            4.3 各組大鼠IL-6、IL-17、IL-10、IL-6/IL-10、IL-17/IL-10比較
            4.4 各組大鼠Th17相關(guān)細(xì)胞因子IL-21、IL-23比較
第三部分 討論
    1.“主客交”病機理論代表方—加減三甲散分析
        1.1 加減三甲散來源及方義分析
        1.2 加減三甲散藥理分析
    2.關(guān)于肝纖維化動物模型的復(fù)制
    3.關(guān)于陽性對照藥物的選擇
    4.加減三甲散對肝纖維化大鼠的干預(yù)
        4.1 對大鼠一般情況的影響
        4.2 對大鼠肝臟病理形態(tài)的影響
        4.3 對大鼠血清肝功能指標(biāo)的影響
        4.4 對大鼠血清肝纖維化指標(biāo)的影響
        4.5 對大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響
    5.加減三甲散對肝纖維化大鼠Th17/Treg平衡的調(diào)控作用
        5.1 對大鼠RORγt、FoxP3、RORγt/FoxP3的影響
        5.2 對大鼠IL-6、IL-17、TGF-β1、IL-6/TGF-β1、IL-17/TGF-β的影響
        5.3 對大鼠IL-6、IL-17、IL-10、IL-6/IL-10、IL-17/IL-10的影響
        5.4 對大鼠IL-21、IL-23的影響
結(jié)論
特色與創(chuàng)新
問題與展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間主要研究成果



本文編號：4052515