目的:通過研究外泌體(exosomes)內(nèi)細胞程序性死亡配體1(Programmed cell death ligand 1,PD-L1)在胃彌漫性大B細胞淋巴瘤(Gastric diffuse large B-cell lymphoma,GDLBCL)細胞培養(yǎng)上清液、正常胃黏膜細胞培養(yǎng)上清液、GDLBCL患者以及正常健康人血漿中的表達水平,探究exosomes內(nèi)PD-L1在GDLBCL中的診療作用。進一步通過轉(zhuǎn)染方法過表達及沉默GDLBCL的exosomes中PD-L1,來研究其對免疫微環(huán)境的作用。方法:收集GDLBCL患者和健康人的血漿,并培養(yǎng)正常胃黏膜細胞、GDLBCL細胞系,采用ExoQuick試劑法提取細胞培養(yǎng)上清液和血漿中外泌體,然后經(jīng)過超速離心純化,并使用透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,TEM)拍攝提取的外泌體,蛋白印跡法(Western blot)實驗及納米顆粒跟蹤分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA)檢測提取的外泌體,再利用Western blot檢測細胞培養(yǎng)上清液和血漿外泌體內(nèi)P...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖4-1細胞培養(yǎng)上清液中外泌體的鑒定NTA測定血漿外泌體的粒徑(nm)(A)；WesternBlot檢測細胞培養(yǎng)上清液中外泌體的標(biāo)志

16第4章實驗結(jié)果4.1細胞培養(yǎng)上清液外泌體的鑒定在提取細胞培養(yǎng)上清液中的外泌體后，我們進行了外泌體NTA檢測，結(jié)果表明：外泌體的直徑主要集中在70至120nm的范圍內(nèi)，并且基本呈正態(tài)分布（圖4-1A）。WesternBlot檢測到細胞培養(yǎng)上清液中外泌體的標(biāo)志蛋白CD9和CD63....

圖4-2細胞培養(yǎng)上清液外泌體內(nèi)的PD-L1表達水平

17節(jié)外泌體內(nèi)PD-L1的表達水平。圖4-2細胞培養(yǎng)上清液外泌體內(nèi)的PD-L1表達水平通過Westernblot測定GDOHH-2、GOCI-LY3和GES-1培養(yǎng)上清液外泌體內(nèi)PD-L1的表達水平(A)；用PD-L1過表達質(zhì)粒和PD-L1干擾質(zhì)粒以及質(zhì)�？蛰d轉(zhuǎn)染胃彌漫大B細胞淋....

圖4-3血漿外泌體的鑒定血漿外泌體標(biāo)志蛋白CD9和CD63的表達，β-actin被用作內(nèi)參(A)

17節(jié)外泌體內(nèi)PD-L1的表達水平。圖4-2細胞培養(yǎng)上清液外泌體內(nèi)的PD-L1表達水平通過Westernblot測定GDOHH-2、GOCI-LY3和GES-1培養(yǎng)上清液外泌體內(nèi)PD-L1的表達水平(A)；用PD-L1過表達質(zhì)粒和PD-L1干擾質(zhì)粒以及質(zhì)�？蛰d轉(zhuǎn)染胃彌漫大B細胞淋....

圖4-4血漿外泌體內(nèi)PD-L1的表達水平正常健康志愿者血漿外泌體中PD-L1的表達水平和胃彌漫大B細胞淋巴瘤患者血漿外

184.4血漿外泌體內(nèi)PD-L1的表達水平胃彌漫大B細胞淋巴瘤患者血漿外泌體內(nèi)PD-L1的表達水平與正常健康志愿者血漿外泌體內(nèi)PD-L1的表達水平的比較：WesternBlot檢測結(jié)果顯示，胃彌漫大B細胞淋巴瘤患者血漿外泌體內(nèi)PD-L1的表達水平高于正常健康志愿者血漿外泌體內(nèi)PD....

本文編號：4000148