三陰性乳腺癌細(xì)胞膜表面高表達(dá)表皮生長因子受體(epithelial growth factor receptor,HER1),肝細(xì)胞生長因子受體(c-Met)是目前腫瘤防治研究中重要的藥物靶點(diǎn),但其在腫瘤細(xì)胞膜表面的存在形式和分布特點(diǎn)仍未見詳細(xì)報道。本文利用金納米顆粒標(biāo)記HER1、c-Met分子并利用掃描電鏡對三陰性乳腺癌細(xì)胞膜表面HER1、c-Met分子進(jìn)行了納米尺度下的超高分辨成像研究。結(jié)果顯示在三陰性乳腺癌細(xì)胞膜表面HER1以單體、二聚體和多聚體的形式存在,HER1在MB-231細(xì)胞表面在常單體比例為37.98%,二聚體比例約為12.22%,多聚體比例為49.80%。c-Met在MB-231細(xì)胞表面在常規(guī)培養(yǎng)條件下單體比例為39.50%,二聚體比例約為13.44%,多聚體比例為49.06%。在同一個細(xì)胞表面c-Met主要分布在細(xì)胞的邊緣處,內(nèi)部分布數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于細(xì)胞邊緣處。MB-231細(xì)胞在無血清的環(huán)境下培養(yǎng)12小時后成像觀察發(fā)現(xiàn)無配體誘導(dǎo)的MB-231細(xì)胞表面c-Met主要以單體形式存在,其比例為88.00%,二聚體比例為8.00%,多聚體比例為4.00%。在相同的無血清的條件下...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫詞
第1章 緒論
    1.1 三陰性乳腺癌簡介
    1.2 表皮生長因子受體家族與肝細(xì)胞生長因子受體
        1.2.1 表皮生長因子受體家族Ⅰ結(jié)構(gòu)與功能
        1.2.2 肝細(xì)胞生長因子受體結(jié)構(gòu)與功能
        1.2.3 表皮生長因子受體家族Ⅰ與肝細(xì)胞生長因子受體成像研究
    1.3 核酸適配體
        1.3.1 核酸適配體技術(shù)簡介
        1.3.2 核酸適配體技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)
    1.4 電子顯微鏡簡介
        1.4.1 掃描電子顯微鏡
        1.4.2 掃描電鏡-掃描透射模式成像簡介
        1.4.3 透射電子顯微鏡
        1.4.4 電鏡液體裝置簡介
    1.5 內(nèi)容及意義
第2章 核酸適配體與靶蛋白特異性結(jié)合
    2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 六孔板培養(yǎng)細(xì)胞
        2.3.2 提取蛋白
        2.3.3 Weston Blot檢測
        2.3.4 免疫熒光檢測
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 Weston Blot檢測結(jié)果
        2.4.2 免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.5 本章小結(jié)
第3章 三陰性乳腺癌表面HER1和c-Met單分子成像
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)耗材
        3.1.2 溶液配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.3.2 ITO玻璃處理
        3.3.3 細(xì)胞在ITO玻璃上的培養(yǎng)
        3.3.4 MB-231細(xì)胞標(biāo)定金顆粒
        3.3.5 液體池(liquid cell)處理
        3.3.6 細(xì)胞培養(yǎng)在liquid cell中
        3.3.7 MB-231標(biāo)定量子點(diǎn)
    3.4 統(tǒng)計(jì)分析
    3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.5.1 HER1在液體池中成像
        3.5.2 MB-231細(xì)胞在SE與BSE模式下成像
        3.5.3 c-Met在細(xì)胞膜表面的表達(dá)與討論
        3.5.4 添加配體對c-Met分布聚合狀態(tài)的影響
    3.6 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間科研成果
致謝



本文編號：4001836