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CYBA基因與先兆子癇相關性的研究

發(fā)布時間:2025-06-24 04:17
  目的本文旨在探究編碼煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶p22phox亞基的CYBA基因在先兆子癇孕婦胎盤中的表達和山東地區(qū)人群中該基因C242T位點單核苷酸多態(tài)性與重度先兆子癇的相關性,為先兆子癇的發(fā)病機理提供新的理論依據(jù)。方法首先收集了2017年06月至2018年10月在青島大學附屬醫(yī)院產科住院并分娩的先兆子癇和健康孕婦的胎盤,從中隨機選取先兆子癇胎盤21例、健康胎盤21例作為研究對象。從胎盤組織提取總RNA和蛋白,分別用相對熒光定量PCR和Western-Blot方法檢測CYBA基因的表達情況。采用Graphpad Prism軟件進行數(shù)據(jù)分析。另外收集了2014年1月至2017年12月在青島大學附屬醫(yī)院、山東省立醫(yī)院、濱州醫(yī)學院附屬醫(yī)院等就診的妊娠婦女的外周血。應用R語言的logit模型(PS值?0.2SD),對民族、年齡、身體質量指數(shù)(BMI指數(shù))、孕次進行1:1.2樣本數(shù)的傾向評分匹配,篩選出重度先兆子癇病例1184例、健康對照1421例作為研究對象。提取以上2605例研究對象的外周靜脈血DNA,通過TaqMan探針法對CYBA基因的C242T多態(tài)性進行基因分型研究。P<0.0...

【文章頁數(shù)】:50 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖3匹配前后病例組和對照組的傾向評分分布

圖3匹配前后病例組和對照組的傾向評分分布

院倫理委員會根據(jù)赫爾辛基宣言的道德規(guī)范批準。應用Ri3863.4.3軟件的logit模型(PS值0.2SD),對研究對象民族、年齡、身體質量指數(shù)(BMI指數(shù))、孕次進行1:1.2樣本比例的傾向評分匹配(圖3),從1800例重度PE和5000例健康對照中篩選出重度PE病例11....


圖4Taqman探針法熒光定量PCR技術原理圖

圖4Taqman探針法熒光定量PCR技術原理圖

青島大學碩士學位論文基團的猝滅作用被解除,熒光報告基團的熒光信號被釋放出來,到熒光信號(圖4)。因此,在PCR反應過程中,每復制一次特定個探針,釋放一個熒光信號,隨著PCR循環(huán)次數(shù)的增加,儀器檢形成一條呈“S”形的DNA擴增曲線(圖5)。當待測DNA中沒有不能與DNA片段結合,不....


圖5Taqman探針法熒光定量PCR技術擴增曲線

圖5Taqman探針法熒光定量PCR技術擴增曲線

就切斷一個探針,釋放一個熒光信號,隨著PCR循環(huán)次數(shù)的增加,儀器檢測到的熒光信號就形成一條呈“S”形的DNA擴增曲線(圖5)。當待測DNA中沒有靶基因時,熒光探針不能與DNA片段結合,不會被Taq酶的5→3'外切酶切斷,就不會釋放熒光信號,儀器檢測不到熒光信號,就形成一條與基線平....


圖6基因分型測序結果圖

圖6基因分型測序結果圖

3.5.3基因分型使用TIB-8600熒光定量PCR儀及其軟件對擴增結果進行基因分型。隨機選取不同基因型DNA經(jīng)普通PCR擴增后進行一代測序驗證(圖6),應用BioEdit軟件讀取測序結果,測序結果與TaqMan探針法基因分型結果進行比較以驗證TaqMan探針法的準確性。圖6....



本文編號:4052474

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