同源重組過程由重組酶介導(dǎo),對維持細(xì)胞的遺傳穩(wěn)定性有極大的作用.鏈交換是同源重組的關(guān)鍵過程,研究鏈交換發(fā)生的基本步長對理解整個反應(yīng)機制有著重要的作用. Rec A作為原核生物重組酶的重要成員,近年來持續(xù)受到廣泛關(guān)注,但Rec A介導(dǎo)的同源重組鏈交換的步長目前還有爭議.現(xiàn)在主流的觀點認(rèn)為鏈交換步長為3 bp,而我們的前期工作測得步長的最可幾值為9 bp.為了進(jìn)一步驗證我們的結(jié)論,進(jìn)而為更深層次的機理研究提供基礎(chǔ),本文采用酶切保護(hù)實驗和單分子磁鑷,配合使用不同的錯配堿基序列從側(cè)面驗證了鏈交換步長不為3 bp,而更傾向于9 bp,并分析了一個步長內(nèi)的錯配堿基數(shù)目和分布對鏈交換進(jìn)程的影響.該結(jié)論為進(jìn)一步探索重組酶工作的分子機理提供了基礎(chǔ)和新的思路.

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本文編號：4028942