在本論文中,我們發(fā)現(xiàn)并證實(shí)了 Vav2的SH2結(jié)構(gòu)域能夠識(shí)別膜磷脂。Vav2是Rho家族小GTP酶的鳥苷酸交換因子(GEF),分布在胞質(zhì)內(nèi),通過其SH2結(jié)構(gòu)域被招募到質(zhì)膜上參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。我們發(fā)現(xiàn)Vav2 SH2結(jié)構(gòu)域可以結(jié)合PI(4,5)P2/PI(3,4,5)P3。通過生化和NMR實(shí)驗(yàn),我們揭示了 Vav2SH2結(jié)構(gòu)域特異性識(shí)別磷脂頭diC4-PI(4,5)P2/PI(3,4,5)P3以及受體酪氨酸激酶EphA2近膜區(qū)的分子機(jī)制,并進(jìn)一步發(fā)展了小肽nanodisc體系(含鎳磷脂的Ni-NTA-nanodisc),更好地模擬近生理狀態(tài)下Vav2 SH2結(jié)構(gòu)域與膜上EphA2近膜區(qū)的結(jié)合。此外,我們還對(duì)輔酶Q生物合成限速酶UbiG膜識(shí)別機(jī)制進(jìn)行了初步探究。第一章是對(duì)本文研究的相關(guān)領(lǐng)域進(jìn)行了背景介紹,主要介紹了磷脂和細(xì)胞質(zhì)膜在調(diào)控蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能上的重要作用;膜模擬體系nanodisc在研究膜蛋白結(jié)構(gòu)和膜識(shí)別機(jī)制的巨大優(yōu)勢(shì);SH2結(jié)構(gòu)域在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中通過磷酸化酪氨酸依賴的方式介導(dǎo)蛋白-蛋白相互作用;以及Vav2作為GEF在細(xì)胞內(nèi)的重要功能。第二章的內(nèi)容是關(guān)于Vav2 SH2結(jié)構(gòu)域與膜磷...

【文章頁數(shù)】：113 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．３酸性甘油磷脂在質(zhì)膜內(nèi)外分布不均的機(jī)制Ｍ??１．２．３質(zhì)膜磷脂和蛋白質(zhì)的相互作用??

?第１章研究背景???區(qū)域［２３］。磷脂在內(nèi)外質(zhì)膜的異質(zhì)化分布的原因還沒有研宄透徹，目前，有三種磷??脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白參與調(diào)控磷脂內(nèi)外膜轉(zhuǎn)運(yùn)過程（圖１．３Ａ），?Ｆｌｉｐｐａｓｅ將外膜上的磷脂??轉(zhuǎn)運(yùn)到內(nèi)膜上，而ｆｌｏｐｐａｓｅ行使相反的功能，磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)過程中都需要ＡＴＰ提供??能量。Ｓ....

圖１．６胞質(zhì)內(nèi)蛋白質(zhì)被招募到質(zhì)膜上示意圖ＰＩ??

?第１章研究背景???＿、ｌ??ＭＣ??Ｉ??圖１．５?Ｔ細(xì)胞受體胞內(nèi)區(qū)結(jié)構(gòu)構(gòu)象的轉(zhuǎn)變％??圖注：（Ａ）非活化狀態(tài)的Ｔ細(xì)胞受體中，ＣＤ３ｅ和ＣＤ３（通過靜電作用插入到內(nèi)膜里，??阻止激酶Ｌｃｋ激活丨ＴＡＭｍｏｔｉｆ。（Ｂ）Ｔ細(xì)胞受體被激活時(shí)，ＩＴＡＭｍｏｔｉｆ完全從膜??上解離下....

圖１．５?Ｔ細(xì)胞受體胞內(nèi)區(qū)結(jié)構(gòu)構(gòu)象的轉(zhuǎn)變％??

?第１章研究背景???＿、ｌ??ＭＣ??Ｉ??圖１．５?Ｔ細(xì)胞受體胞內(nèi)區(qū)結(jié)構(gòu)構(gòu)象的轉(zhuǎn)變％??圖注：（Ａ）非活化狀態(tài)的Ｔ細(xì)胞受體中，ＣＤ３ｅ和ＣＤ３（通過靜電作用插入到內(nèi)膜里，??阻止激酶Ｌｃｋ激活丨ＴＡＭｍｏｔｉｆ。（Ｂ）Ｔ細(xì)胞受體被激活時(shí)，ＩＴＡＭｍｏｔｉｆ完全從膜??上解離下....

圖１．７常見的膜蛋白研究體系??１．３．１常見的膜蛋白研究體系??

?第１章研究背景???相對(duì)較少。膜蛋白在所有形式的生命中都很重要［２８］，人類基因組編碼的蛋白質(zhì)約??３０％是膜蛋白，當(dāng)前所有藥物靶標(biāo)有７０％是膜蛋白，而己報(bào)道的膜蛋白的結(jié)構(gòu)模??型僅占膜蛋白總數(shù)的３％，差距懸殊這種巨大差異的主要原因是膜蛋白的內(nèi)??在特征，包括膜蛋白在水中不溶性....

本文編號(hào)：4053690